气相色谱法测定头孢吡肟中N┐甲基吡咯烷杂质含量.docVIP

气相色谱法测定头孢吡肟中N┐甲基吡咯烷杂质含量 【摘要】 　　 目的 用气相色谱法测定盐酸头孢吡肟中N-甲基吡咯烷杂质含量。 方法 采用毛细管气相色谱法，氢火焰离子化检测器（FID），弹性石英毛细管柱HP-1（60m×0.53mm，5μm）;柱温100;气化室温度250;检测器温度250;载气为氮气;进样量1μl;分流比为101。 结果 N-甲基吡咯烷浓度在1.1213～134.56μg/ml时线性关系良好，线性方程:A 吡咯烷 /A内标 =0.01561C-0.00854，相关系数r=0.99998;RSD（%）=0.00486。加样回收率101.73%;检测限0.6ng。 结论 本法简便、准确、适用性广，便于在生产过程中进行监控。 【关键词】 气相色谱法 　　头孢吡肟（cefepime）为第四代广谱头孢菌素，它对革兰阴性菌，特别是肠杆菌、铜绿假单胞菌有良好活性，同时保持了对革兰阳性菌的作用，临床广泛用于防治多种细菌感染性疾病 ［1］ 。 头孢吡肟母核3位侧链上的一个基团为N-甲基吡咯烷（N-methylpyrrolidine，NMP），其四价氮正离子与4位侧链羧基形成分子内盐结构，可提高水溶性，增强抗菌作用，但N-甲基吡咯烷有可能从头孢烯骨架上分解，造成残留，故须对头孢吡肟中的N-甲基吡咯烷残留量进行检测。 文献 ［2］采用气相色谱法，顶空进样进行测定，由于头孢吡肟在受热条件下会降解产生NMP，使测定结果偏高;此外，残留的头孢吡肟有可能吸附NMP，使得进样后NMP不出峰。本文采用氯仿 提取、直接进样的方法测定盐酸头孢吡肟中NMP的含量，方法普及性强，测定方便，色谱峰稳定，峰形美观，检测灵敏。 　　1 仪器和试药 HP-4890气相色谱仪，氢火焰离子化检测器（FID）;盐酸头孢吡肟（批号:010703、010801、010802）为广州白云山化学制药厂试制。N-甲基吡咯烷为化学纯，ACROS Organics，Inc.97%，批次A018227401;吡啶，化学纯，天津市永大化学试剂开发中心，99.5%;氯仿、二氯甲烷、乙醇、丙酮均为 分析 纯。 　　2 色谱条件 色谱柱为弹性石英毛细管柱HP-1（60m×0.53mm，5μm）;柱温100;气化室温度250;检测器温度250;载气为氮气;进样量1μl;分流比为101。 　　3 方法与结果 　　3.1 溶液的配制 内标溶液 取吡啶约0.1g，精密称定，置100ml容量瓶中，加氯仿稀释至刻度，摇匀。 对照品溶液 取N-甲基吡咯烷约0.1g，精密称定，置100ml容量瓶中，加氯仿溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取贮备液与内标溶液各5ml，置100ml容量瓶中，加氯仿稀释至刻度，摇匀。供试品溶液 取盐酸头孢吡肟约0.2g，精密称定，置研钵中，加氯仿2ml，在通风橱内研磨3min，用氯仿分次转移至10ml容量瓶中，精密加入内标溶液0.5ml，并用氯仿稀释至刻度，充分振摇，滤过，取续滤液。 　　3.2 专属性 盐酸头孢吡肟合成过程中使用的溶剂包括有乙醇、丙酮、二氯甲烷，分别取N-甲基吡咯烷、吡啶、丙酮、乙醇、二氯甲烷各约0.1g，置同一100ml容量瓶中，用氯仿稀释至刻度，摇匀，精密量取1μl注入气相色谱仪，记录色谱图。结果表明，乙醇、丙酮、二氯甲烷、吡啶与N-甲基吡咯烷的分离度符合系统要求，相对保留时间（RRT）依次为:乙醇（0.76）、丙酮（0.79）、二氯甲烷（0.86）、氯仿（1.00）、N-甲基吡咯烷（1.25）、吡啶（1.50）。 3.3 标准曲线的制备及结果 精密量取对照品贮备液0.1、0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0与12.0ml，分别至100ml容量瓶中，各精密加入内标溶液5ml，加氯仿稀释至刻度，摇匀，取1μl注入气相色谱仪，记录色谱图。以N-甲基吡咯烷浓度为横坐标，以A 吡咯烷 /A 内标 为纵坐标绘制标准曲线，得到回归方程为:A吡咯烷 /A 内标 =0.01561C-0.00854，r=0.99998。 N-甲基吡咯烷浓度在1.1213～134.56μg/ml范 围线性关系良好。 3.4 精密度和检测限 精密量取对照品贮备液3.0、5.0与7.0ml，分别置100ml容量瓶中，各精密加入内标溶液5ml，加氯仿稀释至刻度，摇匀，取1μl注入气相色谱仪，每个浓度分别连续进样6次，以测得的N-甲基吡咯烷峰面积与内标峰面积的比值 计算 RSD，结果为0.51%。 上述色谱条件下，N-甲基吡咯烷最低检出限为0.6ng（S/N=3）。 　　3.5 回收率 精密称取已知NMP浓度的样品9份，各约0.2g，置研钵中，加入氯仿2ml，在通风橱内研磨3min，用氯仿分次转移至10ml容量瓶中，各精密加入内标溶液0.5