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无性系育种专题 ——梨属植物无性育种研究进展 梨属植物无性育种研究进展 1. 概述 无性系育种（Clonal Breeding）在天然群体或人工杂交、诱变群体中，选择优良个体，通过无性繁殖形成无性系，按一定育种目标和要求，经无性系测定选育出优良无性系并应用于生产的育种技术。包含两个内容：一是无性系选育（Selection of Clone） ；二是优良无性系造林（Clonal Afforestation）。也就是大规模采用选育出的优良无性系进行人工林定向培育。 梨(Pyrus)属蔷薇科植物，有30个种。我国梨栽培品种有白梨(P.bretschneideri)，秋子梨(P．ussuriensis)，沙梨(P．pyrifolia)和西洋梨(P．communis)，其中前三种为东方梨，原产我国。梨是我国传统的果品。我国梨的栽培历史悠久，是东方梨的主要生产国，是世界梨的原产中心之一。梨的果实含有多种营养成分，如蛋白质，脂肪，糖，维生素以及多种矿质元素等，这些都是人体所必需的，因而深受人们的喜爱。然而梨树在生产中还存在某些亟待解决的问题。由于童期长和基因高度杂合两大特点使其传统的有性杂交育种成效低，工作量大。如何缩短育种时间和提高育种效率成为梨树育种工作者长期追求的目标。随着分子生物学，特别是组织培养和基因工程技术的不断进步，利用生物技术进行育种已成为可能。现就梨无性育种的研究进展作一综述。 2．无性系育种的意义 无性繁殖可继承母本的阶段性发育，从而缩短育种周期。无性繁殖的遗传改良中的潜力较大；在无性繁殖中，通过寄主基因型和病原菌基因型间基本关系的研究，有助于对育种材料的评定和抗病类型的筛选，通过微型嫁接或组培可以分离出无病毒的健壮无性系；通过扦插生根和愈伤组织根原基分化的研究，有助于了解不定根发生和发育的条件，了解生根的遗传学机理；通过原生质体融合的体细胞杂交，有助于了解无性杂交和无性杂种的实质。 3无性系选育实例 3.1 杨树、柳树无性系选育程序 杨树和柳树的改良程序大体上可分为杂交、 无性系选择、无性系测定、建立优良无性系采穗圃几个阶段。 杨树、柳树无性系选育程序 3.2.2 欧洲云杉无性系选育程序 欧洲云杉在德国和中欧是一种最重要的树种，约占森林总面积的40％，其缺点之一是要到20-25年时才开始结实，已建的种子园尚未得到应有的效果。在联邦德国采取了种源选择与无性系选择相结合的欧洲云杉的改良方式，认为这样做能比种子园繁殖有更快更好的效果。 J. Kleinschmit和J. Schmidt (1977年）所制定的欧洲云杉无性系选育程序 3.2.3巴西桉树无性系选育程序 巴西桉树无性系育种，是在美国著名树木改良专家，南方松种子园倡导者B, Zobel教授指导下，由Ararur Florestal公司进行的。该公司对巨桉和巨桉与尾叶桉的杂种最感兴趣。先由澳大利亚选出了大约300株优良母树，在巴西进行子代测定后作为采种母树，由优良家系中选出优良个体，种植到无性系收集区。把入选树相互杂交再进行试验，从优良家系中进行渐进代选择。 为此建成几个每组包括20株树的育种群，生产第二代杂种。以后各代仍依此法不断进行改良，由改良了的巨桉和尾叶桉杂交，生产“优良杂种”。从中选株再繁殖无性系，用于造林。 巴西桉树无性系选育程序 4.无性育种在梨属植物中的应用 4.1 组织培养 早在20世纪30年代，TukeY(1935)进行梨的胚胎培养获得成功。1975年，前苏联学者进行洋梨幼胚培养，获得植株。1979年赵惠祥等进行早熟系208X早酥梨杂种胚胎培养，得到比亲本更为早熟的优良单株，他还在1981年从锦丰梨胚乳培养诱导出完整植株。1979年David和1981年赵惠祥从茎尖培养中，分别得到试管苗和完整植株。此外还进行了下胚轴，子叶横切段的培养，都成功地获得了不定芽。目前，梨的组织培养工作已有广泛的发展，大多数集中在叶片培养和茎尖培养两个方面。研究结果表明，不同品种，即使同一品种不同的外植体，所采用的培养基的种类、植物生长调节剂的比例和浓度、培养条件等因素也不相同。个方面。研究结果表明，不同品种，即使同一品种不同的外植体，所采用的培养基的种类、植物生长调节剂的比例和浓度、培养条件等因素也不相同。 4.1．1 叶片培养 叶片是梨组织培养中普遍采用的外植体。梨叶片培养起步较晚，始于1988年。Laimer等用西洋梨品种康佛伦斯(Conference)试管苗叶片做试验，在BA和IBA的配合下，部分愈伤组织能够形成球状结构，但仅有少量球状结构转化成了不定梢。在随后的十几年的时间里，科研工作者对不同梨的品种进行了以叶片为外植体的组织培养工作。 基本培养基是影响梨叶片再生的重要因素。许多研究表明，组织培养中广泛使用的MS培养基并不适合梨叶片不定芽的诱导