酵母双杂交方法对牛CMYA1中Xin+Repeat结构域的鉴定.pdfVIP

第24 卷 第1 期 天 津 农 学 院 学 报 Vol. 24 ，No. 1 2017 年3 月 Journal of Tianjin Agricultural University March ，20 17 文章编号：1008-5394 （2017 ）0 1-0028-06 酵母双杂交方法对牛CMYA1 中Xin Repeat 结构域的鉴定 王婷，岳英伟，杨淑萍，靳聪飞，辛向博，张晓娟，郭宏通信作者 （天津农学院动物科学与动物医学学院，天津 300384 ） 摘 要：CMYA1 是肌肉生长发育相关基因，其表达产物包含若干个由 16 个氨基酸构成的重复序列， 该重复序列被命名为 Xin Repeat 。为确定 CMYA1 的蛋白结合核心结构域，本研究利用酵母双杂交 方法，以牛 CMYA1 基因的表达产物中含有 Xin Repeat 的区域作为预测结构域，通过对该区域的不 同区段进行克隆建立酵母诱饵表达载体，并转化酵母菌，再与 CMYA1 的互作蛋白 EIF3G 和 RPL35A 进行酵母双杂交。结果表明，共获得了 6 个不同区段的 CMYA1 片段，并确定了 4 个 Xin Repeat 序 列是蛋白结合结构域的最小功能单位。本研究结果有助于揭示 CMYA1 结构及 Xin Repeat 的功能， 为进一步研究牛肌肉生长发育的分子机制提供理论依据。 关键词：CMYA1 ；Xin Repeat ；结构域；酵母双杂交 中图分类号：S813.1 文献标识码：A Identification of Xin Repeat Domain of CMYA1 in Bovine by Yeast Two-Hybrid WANG Ting, YUE Ying-wei, YANG Shu-ping, JIN Cong -fei, XIN Xiang -bo, ZHANG Xiao-juan, GUO Hong Corresponding Author （College of Animal Science and Veterinary Medicine, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China ） Abstract: CMYA1 is a muscle development related gene which expression product contains a number of repeat sequences composed of 16 amino acids, named Xin Repeat. To determine the CMYA1 domain of protein interaction, this study used Xin Repeats as a predicted domain of CMYA1. According to different number of Xin Repeats, we divided CMYA1 into different fragments and cloned into expression vectors and transformed into Yeast strain.As result, we obtained 6 fragments o