八种抗生素检测的结题报告.docVIP

院级本科生科技创新基金项目 研 究 报 告 项 目 名 称 畜、禽肉中八种抗生素的测定 立 项 时 间 2011年3月 计划完成时间 2012年3月 项目负责人 邓明镜 学院与班级 化生学院 生技0901班 2012年 4 月 22 日 北京科技大学 教务处  摘 要 抗生素是由微生物或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物，用于治疗各种细菌感染或其以致病微生物感染病菌 本实验采用高效液相色谱法（HPLC），在中华人民共和国国家标准方法（GB/T 5009.116-2003）的基础上进行优化，旨在建立一种能够同时检测畜禽肉中土霉素（OTC）、金霉素（CTC）、四环素（TC）、氯霉素（CLP）、磺胺、磺胺二甲嘧啶（SM2）、磺胺甲恶唑（SMZ）和氟哌酸（FPA）八种抗生素的方法。实验时色谱条件为：色谱柱规格ODS-C18（5μm） [关键词] 抗生素 高效液相色谱 畜禽肉 目　　录 摘　　要 1 1 绪论 3 1.1 项目背景条件 3 1.2 项目意义 3 1.3 主要工作 3 2文献综述 4 2.1抗生素概述 4 2.1.1抗生素定义 4 2.1.2抗生素种类 4 2.1.3四类抗生素简介 5 2.2 抗生素残留现状 5 2.3 抗生素残留检测方法 6 2.4 高效液相色谱法 7 2.4.1高效液相色谱法原理 7 2.4.2高效液相色谱法特点 7 2.4.3 ODS柱和固相萃取小柱 7 2.5 检出限（LOD）和定量限（LOQ） 8 3畜禽肉中八种抗生素的检测 9 3.1实验材料及仪器 9 3.1.1材料 9 3.1.2仪器 9 3.2实验方法 9 3.2.1猪肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定 9 3.2.2猪肉中氯霉素残留量的测定 10 3.2.3条件优化，鸡肉中四环素残留的测定 11 3.2.4八种抗生素检出限（LOD），定量限（LOQ）和线性范围的确定 11 3.2.5鸡肉中八种抗生素含量的测定 11 3.2.6固相萃取小柱的净化 12 4实验结果与讨论 12 4.1猪肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定 12 4.2猪肉中氯霉素残留量的测定 15 4.3条件优化，鸡肉中四环素残留的测定 17 4.4八种抗生素检出限（LOD），定量限（LOQ）和线性范围的确定 19 4.5鸡肉中八种抗生素含量的测定 19 4.6 固相萃取小柱的净化 24 结　　论 25 参 考 文 献 28 附 录 A原始数据 致　　谢 绪论 1.1项目背景条件 抗生素最早发现于1929年，英国科学家弗莱明培养细菌时观察到，空气中偶然落在培养基上的青霉菌的菌落周围没有其他细菌生长，他认为是青霉菌产生了某种化学物质，并且分泌到培养基中抑制了细菌的生长。这种化学物质就是最早发现的抗生素(antibiotics)——青霉素。青霉素作为治疗细菌感染的特效药，在第二次世界大战中挽救了无数人的生命。 自20世纪初青霉素问世以来，抗生素作为抗感染治疗的重要药物，在保障人类健康中发挥着重要的作用。随着现代医药科学技术的进步，在畜、禽、牧、水生生物等产业领域应用药物对动物进行诊断、预防和治疗疾病，以及促进动物生长、提高饲料转化率等日益普遍，并且带来了可观的经济效益。但人们长期食用这种动物食品及制品，必然会危及人类健康。一些国家相继成立了各种相应的管理组织，通过立法来规范、制定和管理动物组织及产品中抗生素残留的限量标准，我国还加强了对动物性食品中抗生素残留的检测、检查工作以及对各种违法犯罪行为的打击力度。 项目意义 研究表明，动物源食品中残留抗生素是诱发儿童肥胖的一个重要因素，长期食用有抗生素残留的动物性食品，不仅会使病菌产生抗药性，而且还会造成一些非致病菌的死亡。例如人体肠道内寄生着对人体有益的微生物菌群，它们与人体为互利共生关系，正常情况下，微生物菌群处于平衡状态；若体内抗生素积蓄过量，将导致菌群失调，同时肠道内产生维生素B族和维生素Ｋ族的细菌受到抑制，造成严重的肝损害，从而引起维生素缺乏。经常食用含有青霉素、四环素、磺胺类药物的乳肉制品，极易引起易染个体的过敏反应，严重者可引起皮疹、呼吸困难、休克等症状，甚至危及生命。 乳肉类中抗生素的检测根据检测原理不同，主要分为免疫学方法、微生物法和理化分析法三类。但是在动物源性食品中，由于其蛋白质及脂肪含量高、基质复杂等原因，对磺胺及四环素类抗生素残留的测定多采用分别测定的方法，较费时费力。而最有效的检测方法是采用固相萃取净化、色谱分离后进行质谱分析，该法需昂贵的仪器，在推广上受到限制。所以，建立一种简便、快捷、灵敏且同时可以检测多种