IL-1β促进肺癌细胞增殖的作用机制研究.pdf

· 20 · 中国免疫学杂志2017年第 33卷 doi：10．3969／j．issn．1000-484X．2017．01．004 IL．113促进肺癌细胞增殖的作用机制研究① 石玉荣 吴军录② 权文强③ 李 冬②③ (蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室， 蚌埠 233000) 中图分类号 R734．2 文献标志码 A 文章编号 1000-484X(2017)01-0020-05 [摘 要】 目的：研究 IL一131在巨噬细胞促进肺癌细胞增殖的作用机制。方法：采用Transwell~插入式细胞培养皿共培 养人肺癌细胞株 A549、NCI—H520细胞和巨噬细胞。BrdU—ELISA法检测巨噬细胞对肺癌细胞的增殖能力。采用 Rea1．time PCR法检测巨噬细胞和A549、NCI—H520细胞中IL一1pmRNA的表达。应用IL-1p的中和抗体抑制 IL．1p的活性，观察 IL一1B 在巨噬细胞促进肺癌细胞增殖 中的作用。利用 Westernblot法检测肺癌细胞中 自噬标志物 Beclin1的表达。结果：BrdU． ELISA检测结果：A549细胞与巨噬细胞以1：0．5的比例共培养，A549细胞的OD值从 (0．41±0．06)增加到 (1．13+0．10)，差异 有统计学意义(PO．05)，且A549细胞的OD值随共培养巨噬细胞 比例的增加而升高(P0．05)。NCI—H520细胞与不同浓度 的巨噬细胞共培养后，NCI—H520细胞的OD值变化趋势与A549细胞相似。Real—timePCR法检测结果 ：在共培养后，巨噬细胞 中IL-1pmRNA的表达显著上调，且有时间依赖性 ，并显著高于肺癌细胞中的表达。加入 IL一1p中和抗体后，BrduELISA法检 测的细胞增殖 ，结果显示 IL-1B中和抗体可明显抑制巨噬细胞对肺癌细胞A549和NCI—H520的增殖促进作用。Westernblot 法检测结果显示 IL一1p可显著抑制肿瘤细胞 Beclin1的表达。结论 ：巨噬细胞和肺癌细胞通过增强 IL一1p的表达促进肿瘤细 胞的增殖。抑制肿瘤细胞的自噬可能是 IL一1B促进肺癌发展的作用机制。 [关键词] 巨噬细胞；肺癌 ；IL一1B；细胞增殖；自噬 StudyonmechanismsofIL-1I3Ipromotedlungcancercellsproliferation SHIYu—Rong，WUJun—Lu，QUANWen—Qiang，LIDong．DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology，Bengbu MedicalCollege，Bengbu233000，China [Abstract] objective：ToinvestigatethemechanismsofIL一1ppromotedlungcancercellsproliferation．Methods：The “Transwell~ Inserts”system wasusedtoCOCulturelungcancercellsA549．NCI—H520withmacrophages．BrdUELISAusedtomeasure theeffectofmacrophagespromotedlungcancercellsproliferation．ExpressionofmRNAofIL一1BinA549andNCI—H520cellswere analysedbyReal—timePCRanalysis．IL一1Bwasresponsibleformacrophage—promotedlungcancercellsgrowth，IL一1pneutralizing antibodywasadded．TheautophagymarkerBeclinlproteinwasdetectedbyWestern blot．Results：TheBrdU ELISA assayshowedthat alftercoincubationwithmacrophagesintheproportionof1：0．5，theODvalueofA549increasedfrom(0．41±0．06)to(1．13±O．10)． Therewasstatisticalsignificance(P0．05)．ItalsoshowedthatthegrowthoftheA5