五环三萜类化合物促进骨形成研究.pdf

主垦量堕堕坠垄查 !堡 筮23卷第3期 ChinJOsteoporos，March2017，Vol23，No．3 PublishedonlineWWW．wanfangdate．coin．cn doi：10．3969／i．i8sn．1006．7108 ． 2017．03．017 357 · 药 物 研 究 · 五环三萜类化合物促进骨形成研究 吉璐宏 赵庭波 仙桃市第一人 民医院骨外二科 ，湖北 仙桃 433000 中图分类号 ：R336；R285 文献标识码 ：A 文章编号 ：1006-7108(2017)03—0357—06 摘要 ：目的 探讨五环三萜类化合物对血清素合成 的抑制活性 以及促骨形成活性。方法 采用高效液相色谱、ELISA试剂盒 和荧光实时定量 PCR测试五环三萜类化合物对 RBL-2H3细胞中血清素合成的关键酶色氨酸羟化酶一1(TPH一1)的抑制率、含 量及 mRNA的表达 。构建去势大 鼠骨质疏松症模型(OVX)25只，并将骨质疏松大 鼠随机分为 3组不同浓度灌 胃给药组 [1O mr,／(kg’d)组、20rag／(kg·d)组、30mg／(kg·d)组]、一组空 白对照组 (OVX组)和一组假手术组 (Sham组)，给药 35d后采用 高效液相色谱测试血清和小肠中血清素水平 。采用 MTT法测试五环三萜类化合物对成骨细胞促进活性。结果 在 RBL一2H3 细胞中，五环三萜类化合物对于 TPH一1的抑制呈剂量依赖性 ，抑制率为 3．6％ 一76．5％ ，其 中 l8B甘草次酸(GA)在 3O M浓 度下展现出了最高抑制率 (76．5％)，并能较空 白组 (219ng／mL)显著地 降低 TPH．1含量 (34ng／mL)及 mRNA的表达 。与 Sham组相 比，大 鼠摘除卵巢 (OVX组)后血清和小肠中血清素的水平明显增高，而经过 GA给药后的大 鼠血清和小肠中血清 素的水平却明显降低，在30IxM浓度下血清 (426n mL)和小肠 (304ng／mL)中血清素的浓度较 OVX组 (含量分别为 1050 ng／mL和 723ng／mL)降低 了至少 2倍 ；此外，GA能够促进乳小 鼠成骨细胞增殖 。结论 1813一甘草次酸能够作为促进骨形成 的先导化合物 ，值得深入研究。 关键词 ：五环三萜类化合物 ；血清索 ；骨质疏松 ；骨形成 ；动物实验 The stimulatingeffectofpentacyclictriterpeneson boneformation JILuhong ．ZHAO Tingbo DepartmentofOrthopedics，XiantaoFirstPeople’sHosptial，Xiantao433000，China Correspondingauthor：JILuhong，E—mail：hc7598@ 126．tom Abstract：Objective Toexploretheeffectofthepentacyclictriterpenesoninhibitionofserotoninbiosynthesisandincreasethe boneformation．M ethods TheinhibitionrateandmRNA expressionofpentacyclictriterpenesontryptophanhydroxylase1fTPH一 1)，whichwastheprincipalenzymeinthebiosynthesisofserotonin，weretestedusingHPLC，ELISA kit，andreal—timePCR． Osteoporosismodelwasdevelopedbyovariectomy (OVX)．Theratsweredividedrandomlyintothreeconeentrationgroups(10 mg／kgperday，20mg／kgperday，or30mg／kgperday)，oneblankcontrolgroup (OVXgroup)，andonesham operationgroup (sham gro