法医论文资料.ppt

运用全自动固相萃取 GC/MS法检验阿米替林 答辩人: 姜 国 琼 指导老师：王 洪 ，张宝富 专 业: 2006级法医学 学 号：200605051 四、案例应用 三、阿米替林的分析方法 二、阿米替林的毒理作用中毒症状、中毒量 一、阿米替林的理化性质 主 要 内 容 理 化 性 质 1、分子结构式 分子式为C20H23N,分子量277.4，盐酸盐为白色粉末，易溶于水、甲醇、乙醇、氯仿，不溶于乙醚。无臭，味苦。非盐状态易溶于乙醚、乙醇等有机溶剂，不容于水。熔点：196-197℃。 阿米替林中毒的药理作用 1、 阻滞多种递质受体 2、 阻滞单胺递质再摄取 癫痫发作、心律失常 中毒症状： 可出现口干、便秘、尿潴留、视力模糊、眼内压升高、乏力、思睡、肌肉震颤、狂躁、幻觉、妄想、心率加快、心力衰竭等症状，最后心肌梗塞、呼吸抑制而死亡。 昏迷、呼吸抑制、 急性： 重度： 阿米替林中毒量 生物检材的前处理 治理技术 Text 阿米替林的分析方法 检材预处理 柱子活化 全自动固相萃取 内标标准溶液配制 酸性、中性药物洗脱 碱性药物洗脱 洗脱液浓缩 干扰物洗脱 仪 器 分 析 （GC/MS分析和GC/FID分析） 依据GA/T-102-1995、 GA/T-188-1998、 GA/T-189-1998标准、中国刑事科学技术大全。毒品和毒物检验 方法： 仪器： 用全自动固相柱净化提取(Zymark Autotrace Spe工作站；Oasis HLB固相柱（1cc/30mg)，用GC/MS法和GC/FID进行分析检测。 所 用 试 剂 甲醇、氯仿、异丙醇、正己烷、乙酸乙酯、0.1M磷酸缓冲液（pH=6.0）、氢氧化钠溶液（pH=10.0）、1.0M醋酸、蒸馏水、内标物烯丙基异丙基巴比妥、SKF525A标准品 GC/MS分析条件 美国Agilent 5973N GC/MSD 1、 HP-5MS柱（30m×0.25mm×0.25μm）石英毛细管柱 2、进样口温度： 290℃ 3、柱温：80℃（1min）20℃/min 300℃（10min） 4、载气流量：1.0mL /min，载气：高纯氦气 5、进样方式：不分流进样；EI源（70eV），离子源温度230℃, 四级杆温度150℃ 6、扫描质量范围50amu -450amu,扫描速度3.62 Scan/Sec，EM电压1490V 。 GC/FID分析条件 1、色谱柱：HP-5（30m×0.32mm×0.25μm） 2、柱温200℃（2min）8℃/min280℃（3min） 3、检测器：火焰离子化检测器（FID） 4、检测器温度：280℃ 5、进样口温度：280℃ 6、载气：高纯氮气，载气流量：1.8 mL/min 7、进样方式：不分流进样 Heraeus冷冻离心机（左） 高速冷冻离心机(3500型)右 GC/FID分析结果 图3 乙 醇 图4 标准SKF525A 图5 阿米替林标准液 图6 检 材 图7 检 材 序号 样品名称 峰面积 峰面积平均值 回收率（%） 精密度 RSD（%） 1 空白添加 1号SKF525A 75.6 73.8 93.7 0.28 75.5 2号SKF525A 70.0 73.9 1号阿米替林 41.7 42.6 88.9 0.29 44.0 2号阿米替林 41.8 43.0 2 阿米替林标准液峰面积 46.4 49.9 49.4 标准SKF525A 峰面积 78.13 78.78 79.43 方法回收率及精密度 讨 论 回收率 Oasis HLB固相柱具有较高而稳定的回收 率，即使柱床干涸，回收率也不受影响。 重现性 极好的批次间重现性 稳定性 良好的化学稳定性；与各种自动化固相萃取装置兼容 高吸附容量，与C18键合硅胶固相柱相比，Oasis吸附剂的表面积大2-3倍，容量因子大大提高，30mg Oasis HLB的吸附容量，相当于100mg C18。 吸附容量 2 3 TEXT 1 Zymark Autotrace Spe工作站具有自动化程度高，选择性高，分析物回收率高，分析物浓缩，样品和试剂用量少，维护简单、操作简便的特点。 2 可以极大的减轻毒物检验人员的工作量和提高毒物检验的检出率。 全自动固相萃取的优点 案 例 应 用