发酵工程-第八章.ppt

∫[CER]dt，菌体干重的时间曲线 1- [CER]dt；2-菌量 （3）CER的测量与计算 测量方法：热导、红外分析仪、质谱仪 计算 （1）研究参数CO2的意义 作为代谢产物或中间前体，尾气中CO2积累与生物量 成正比，通过C质量平衡估算生长速率和细胞量。 高浓度CO2对发酵多表现为抑制作用，应实施测量与 控制； 尾气CO2不仅直接反映代谢情况，而且和其它参数及补料操作密切相关，可作为工艺优化的指标。 （2）CO2对细胞的作用机制 “麻醉”作用 CO2及HCO3-都会影响细胞膜的结构，使膜的流动性及表面电荷密度发生变化，导致许多基质的跨膜运输受阻，影响了细胞膜的运输效率，使细胞处于“麻醉”状态，细胞生长受到抑制，形态发生改变。 （3）CO2对菌体生长及产物形成的影响 CO2↑, 基质分解速率↓，ATP ↓ ，中间产物↓或形态变异导致产量↓ 高浓度CO2抑制作用的独立性: 只要CO2在培养液中浓度过量，即使供氧充足（CLCCr），CO2的抑制作用不能解除，这种负作用在放大过程更明显。 正确评价通气的作用： 供氧： 排废气： 水分及挥发性组分的散失 （4）CO2释放与发酵过程参数pH及操作参数补糖速率的关系 在青霉素发酵中补糖将引起排气CO2增加，同时pH下降。 糖、CO2、pH三者的相关性，被青霉素工业生产上用于补料控制的参数，并认为排气CO2的变化比pH变化更为敏感，所以测定排气CO2释放率 （CER）来控制补糖速率。 补糖与溶氧及pH协同控制 补糖速率与CER控制 补糖对排气CO2和pH的影响 （4）尾气CO2与O2的相关性 相关程度表示： 尾气CO2与O2相关性：反向同步关系 呼吸商（RQ）与发酵的关系 不同菌株、同一菌株不同代谢途径、同一菌株利用不同基质、同一菌株在不同发酵阶段，RQ值不相同。 RQ值可以表征发酵状况。 （1）影响溶解氧（DO）的因素 供氧 耗氧 两大类 以关系式表示： 影响供氧的因素： 影响耗氧的因素： C*- CL 温度、溶质、溶剂、氧分压 KLa 设备参数、操作参数、发酵液特性 菌种特性、培养基成分和浓度、菌龄、培养条件（T、pH）、代谢类型 γ （2）发酵过程中溶氧变化规律 批式发酵无DO控制情况下，溶氧变化规律为“波谷现象” 溶氧、x、QO2、 随时间变化的关系 CL x QO2 平衡点分析： ①当CL↑，即 ，OTRγ ∵ ， ∴OTR逐渐↓至OTR=γ，即 ，高位平衡 当处于高位平衡时，表明供氧性能好。高位平衡通常发生在正常情况的前、后期。 平衡点分析： ②当CL↓（如对数生长期γ很大）， ，OTRγ ∵ ， ∴ ， ，称低位平衡。 低位平衡通常发生在正常情况下的对数期。 值得注意的几点 自然“波谷现象”，一般可以自适应调节（ ） 当 ，则需要控制，增加OTR，防止需氧受阻。 补料与“波谷现象”对应：即补料时间、剂量选择与溶氧变化有关。 a.??不能在波谷时补料，加重缺氧 b.? 一次补料不能过量，防止 ， 菌体停止呼吸、死亡 c.每次补料都会引起一次大的溶氧下降。 （1）溶解氧对生长的影响 临界氧浓度（CCr）： 当 时, 当 时, ∴对生长应满足 , 但并不是越高越好 呼吸抑制 呼吸不受抑制 指不影响菌体呼吸所允许的最低 氧浓度。 （2）溶解氧对产物合成的影响 最适氧浓度（Cm）：溶氧浓度对产物合成有一个最适范围，CL过高或过低，对合成都不利。 e.g.卷须霉素：12~70h之间，维持CL 在10%比在0或45%的产量要高。 （3）CCr与Cm比较：通常Cm与CCr不一致 对于某些菌株 CcrCm, 卷须霉素: 而有些菌株 Ccr Cm, 头孢菌素C： Cm 8% Ccr