人工林不同疏伐强度作业对真菌组成结构与多样性之影响-东海大学.PDF

人工林不同疏伐強度作業對真菌組成結構與多樣性之影響 東海大學 生命科學系 汪碧涵 計畫內容 （一）已完成之重要計畫成果摘要 1. 初步測試及建立樣區真菌多樣性之研究方法 參考 Mueller 等人（2004 ）的方法，初步建立採集菌根真菌多樣性時的採樣 方法，以直線橫截樣區方式穿越已設立好的樣區（一公頃樣區，橫軸為 100 公 尺，縱軸亦為 100 公尺）進行真菌採集。採集到的樣本，再參考 Lodge 等人（2004 ） 的記錄方法先記錄外觀形態特徵資料，再保存於採樣袋中。 實際執行採樣工作後，發現由於樣區林下 植被非常茂密，進行直線穿越樣 區的方式採樣時，在某些無法打樁的特定點上，會因為樁點不在而難以辨認。 比較分析四種小樣區設置方法，經各方法的實地勘查試作，評估考慮樣區的代 表性及實際執行的困難度，決定整合穿越線調查與圓形樣區定位調查的模式， 於每一公頃各樣區內分別設立直徑十公尺之圓形小樣區六個，以現有樁點為圓 心，將位於圓周上的樹木以紅白斑馬膠帶進行標記，座標軸分別為 A （1, 1）、 B （2, 2 ）、C （3, 3 ）、D （4, 2 ）、E （4, 4 ）、F （1, 4），圓形樣區內採定位調查， 各圓形樣區間則採穿越線調查。目前已完成打樁的九個樣區，除了易崩塌的第 四和第五樣區外，其餘皆已完成樣區的標示。 2. 蕈菇類真菌相之調查 在多雨或高濕度的季節，適合真菌產生子實體，今年度颱風頻繁，雨量充沛， 由部分樣區採集到的真菌其中 2種屬於馬勃類（ Lycoperdon spp. ），7種為多孔菌 （polyporus ），3種為黏菌， 3種為盤菌，其餘 36種則為傘菌類。樣本 57和樣本 73的這類多孔菌類出現在第六樣區之後的頻率明顯高於前面的三個樣區。 本研究在天然林共採集得到 13個樣本，其中包括 5個蕈菇樣本、 1個土壤 樣本、2種植物樣本及 5個植物根部樣本，人工林則共採得 75個樣本，其中包 括 41種蕈菇樣本、 3種黏菌樣本、 3種盤菌樣本、 3個土壤樣本、 3種植物樣本 及 22個植物根部樣本。將土壤中的植物根部分離出來後，以解剖顯微鏡觀察記 錄可能為菌根的部位。 共獲得 32個真菌樣本 DNA 、4個植物樣本 DNA及 27個菌根樣本 DNA 。 以擔子菌的廣效性引子對 ITS1F/ITS4B 進行 PCR增幅後，幾乎都能增幅出擔子 菌 ITS DNA 產物。但由萃取得到的植物根部 DNA ，不論是以廣效性引子 ITS5/ITS4 或是 ITS1F/ITS4B 進行 PCR 擴增時，都無法獲得產物；甚至以 ITS1F/ITS4B 進行 booster PCR再一次擴增都無法獲得產物，表示目前採到的植 物根部樣本中可能都未含菌根真菌，或是菌根真菌的量極低，無法以現在的 PCR 方式偵測到。目前根據我們的實地調查，在柳杉林中都沒有發現任何外生菌根 1 菌，以 PCR 方式對根部DNA 進行擴增也沒有得到真菌的產物，初步驗證了文獻 中沒有柳杉外生菌根菌之記載。 將得到的 PCR 產物進行解序，共獲得 15個真菌的核酸序列。將這些核酸序 列上網至 NCBI的 GenBank資料庫中，以 Blastn 與其中的序列資料進行比對， 序列的片段大小相近而可以完全比對的 DNA 序列資料共有 5筆，其他則由於比 對出來所得數值太低，完全無法以序列資料輔助鑑別，仍需進一步鑑定。真菌的 DNA 序列可協助進行真菌菌種的確認，另一方面則交叉比對植物、菌根和真菌 的 DNA資料，可以幫助釐清所採子實體是否為菌根菌，以了解台灣菌根真菌之 多樣性。 （二）擬解決問題 1. 全程目標 為探討人工林生態系經營與生物多樣性保育間的關係，本子計畫研究不同 之疏伐作業，對該人工林中真菌組成結構與多樣性之影響，供作人工林生態系 經營及生物多樣性保育之參考。 2. 本年度計畫緣起 由於過去造林偏重於造林木之木材利用，因此形成大面積單純林相之林 分結構。為符合人工林永續發展－生態系經營之理念，杉木人工林有必要實施 疏伐作業，配合林下人工間植或天然更新方式形成混淆或複層林，以增加杉木 人工林結構之異質度和生物多