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07级医学分子生物学考试 07级医学分子生物学考试 医学分子生物学考试题型：名词解释6个（每个5分，30分），问答7个（每个10分，70分）。75分及格。 名词解释：基因，遗传图，基因表达，基因工程，荧光原位杂交，PCR-SSCP, 基因：是指携带有遗传信息的DNA或RNA序列，也称为遗传因子。是控制性状的基本遗传单位。基因通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息，从而控制生物个体的性状表现。 遗传图：以具有遗传多态性的遗传标记为路标，遗传学距离为图距建立给予遗传学功能的图谱 基因表达：是指基因转录及翻译的过程 基因工程（gene engineering ）：又称为重组DNA技术，是指将外源基因通过体外重组后导入受体细胞，并使其能在受体细胞内复制和表达的技术。 荧光原位杂交（fluorescence in-situ hybridization,FISH）：是一种利用非放射性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的技术。 单链构型多态性分析法（PCR-SSCP）：将PCR产物双链DNA（dsDNA）变性为单链DNA（ssDNA），加样于变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，由于DNA分子在凝胶中的电泳迁移率与其分子量和空间结构有关，而空间结构又与ssDNA序列有关。因此，电泳结束后，ssDNA带位置的差异即可反映出PCR产物序列的差异，从而对DNA中的单个碱基的替代、微小缺失或插入进行检测。 问答题： HBV复制？ 1、是目前已知的感染人类的最小的嗜肝双链DNA病毒。 2、结构特别精密浓缩： （1）环状的部分双螺旋结构，长约3.2kb。2/3为双螺旋结构，1/3为单链，两条链不等长。 （2）长链为负链，短链为正链。a、长链：5’端与3’端与一种蛋白质共价相连。b、短链：约为长链2/3。短链间的空隙可由DNA聚合酶充填。 （3）基因重叠使病毒在很小的基因组中容纳大量的遗传信息。a.重叠的基因序列较多，有4个开放读码框（ORF），分别编码病毒的核壳（C）、包膜（S）蛋白、病毒复制酶、与病毒基因表达有关的蛋白质。b、调节序列位于基因内部：是节约使用遗传物质的一种方式。启动子存在于编码蛋白质序列内；增强子位于聚合酶基因中；polyA附加信号位于ORFC中；GRE位于ORFS和聚合酶基因中。 3、逆转录复制。 遗传信息的传递过程？ central dogma：中心法则：遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质的转录和翻译过程，以及遗传信息从DNA传递给DNA的复制过程。 对癌基因，原癌基因和抑癌基因的认识？ 癌基因：在人体正常细胞中存在，调控细胞生长和分化的原癌基因被致癌因素激活，发生数量上或结构上的变化转化为癌基因，可致细胞癌变。抑癌基因：正常细胞中对细胞的增殖分化有调节作用，对细胞的异常生长和恶性转化具有抑制作用的基因。 限制性内切酶在分子克隆中的作用，并举例说明？ 载体的认识？ 载体（vector）：指能携带外源DNA片段导入宿主细胞进行扩增或表达的工具。本质为DNA。制备的目的基因或外源性DNA片段必须与合适的载体连接形成重组体，才能进入受体细胞并进行复制和表达。包括克隆载体和表达载体。特征：能自我复制并具较高的拷贝数，分子量一般10Kb；带有遗传筛选标记；有适当的限制酶切位点，便于外源基因的插入和筛选。 结合你的专业，谈谈对基因诊断的认识？ 基因诊断：利用分子生物学和分子遗传学技术，从DNA/RNA水平检测和分析基因的存在和结构、变异及表达状态，从而对疾病作出诊断的方法。 对疾病或与致病相关的基因（DNA）的表达产物（mRNA、蛋白质）的确定和序列测定，实现疾病的早期诊断。特点:①特异度高。可检测DNA片段的缺失、插入、重排，甚至单个碱基的突变。②灵敏度高。待测标本只需微量,目的基因只需pg水平。③稳定性高。基因的组成是核酸，比蛋白质稳定得多，且被测基因不需为活性状态。④诊断范围广,适用性强。能对某些疾病作出确切诊断,确定与疾病的关联状态。⑤临床应用前景好。途径：1、基因突变的检测：a、限制性核酸内切酶酶谱分析。b、分子杂交：定义。利用探针与靶DNA杂交，可识别靶DNA中的特异核苷酸序列。c、DNA芯片技术；d、DNA测序技术2、基因连锁分析：限制酶片段长度多态性连锁分析（RFLP）：DNA序列的多态性如果发生在限制性内切酶的识别位点上，就会造成酶切位点的缺失或新位点的出现，酶切后DNA片段长度发生变化。若某一致病基因与特异的多态性片段紧密连锁，就可用这一多态性片段作为“遗传标记”来判断基因组中是否携带致病基因。3、mRNA检测：可利用反转录PCR扩增mRNA来研究基因转录。先进行反转录，然后进行常规PCR。 原核生物和真核生物基因组的不同点？ 1、原核生物为裸露的环形DNA；真核生物细胞核中含线性DNA，线粒体也含少量环状