药剂学课件 中药制剂现代化、生物技术药物制剂.pptVIP

第十七章 药物的新剂型 第五节生物技术药物制剂 一、生物技术与生物技术药物的基本概念 生物技术（Biotechnology）是应用生物体（包括微生物，动、植物细胞）或生物体的组成部分（细胞器和酶），在最适条件下，生产有价值的产物或进行有益过程的技术。 二、蛋白质类药物的结构与稳定性 （一）蛋白质（类药物）的组成和结构 （二）蛋白质的不稳定性 蛋白质的不稳定性可分为两种：即化学不稳定和物理不稳定。 2．物理不稳定性 物理不稳定是指蛋白质分子的高级结构发生物理转变，但并无共价键的改变。物理不稳定包括变性、聚集、沉淀和表面吸附。 例如：由于伸展、非天然的重新折叠、氢键的变化和相互作用力的改变可使蛋白质的三维结构发生变化。加热也可以使蛋白质变性失活。 （一）液体剂型蛋白质类药物的稳定化 有两种稳定化的方法： 改造蛋白质结构：例如改变蛋白质一级序列或取代反应官能团，其主要原理是提高蛋白质伸展自由能。该方法不属制剂范畴，本章不加以讨论 改变与蛋白质接触的溶剂的性质：通过加入辅料，改变溶剂的性质是药物制剂中常用的稳定化方法，其稳定化的机理有两种：①加强蛋白质稳定作用力。②使其变性状态不稳定。常加入的辅料有： 1．缓冲液 因为pH值与蛋白质的物理稳定性、化学稳定性均有关，并且蛋白质的稳定pH范围通常很窄，所以准确控制pH值是蛋白质制剂稳定化的第一步。 遗憾的是目前在选择缓冲体系方面尚毫无规律可寻，目前常用的缓冲液有磷酸盐、醋酸盐和枸橼酸盐缓冲液，其中最常用的是磷酸盐缓冲液。 2. 糖和多元醇 糖和多元醇属于非特异性蛋白质稳定剂，其稳定机制是优先排除。 蔗糖和海藻糖是最常用的糖（但不能使用还原糖，因为它与氨基酸有相互作用的可能）。 甘油、甘露醇、山梨醇（浓度1%-10%）是常用的多元醇，其中最常用的为甘油。 糖和多元醇类的稳定作用与其使用浓度密切相关，在处方中，一般认为最小使用量是0.3M或5%浓度；但在提取分离时，糖的浓度可达1M，多元醇可达10%。 不同糖和多元醇对蛋白质稳定程度不同，这主要取决于蛋白质的种类。 3．表面活性剂 表面活性剂可降低蛋白质溶液的表面张力，抑制蛋白质在疏水性表面的聚集、沉淀和吸附，或阻止蛋白质的化学降解。 可供选择的表面活性剂有两类： 非离子型表面活性剂：如聚山梨酯类、泊洛沙姆（Poloxamer）等； 阴离子表面活性剂：如十二烷基硫酸钠。 4 . 盐类 盐即可以起到稳定蛋白质的作用，也可以破坏蛋白质的稳定性，还有可能毫无影响，这主要取决于盐的种类、浓度、离子相互作用的性质及蛋白质的电荷。 一般低浓度的盐通过非特异性静电作用可以提高蛋白质的稳定性。 5．聚乙二醇类 高浓度的PEG 类，常作为蛋白质的低温保护剂和沉淀/结晶剂，它可与蛋白质的疏水链作用。 研究表明：PEG4000不同浓度（可高达15%）可抑制LMW-UK的热聚集。PEG类的稳定作用的机制仍不清楚。 研究表明：不同分子量的PEG作用不同，如PEG300浓度0.5%或2%可抑制rhKGF的聚集；PEG200、400、600、和1000可稳定BSA和溶菌酶。 6．大分子化合物 有关研究已表明：很多大分子化合物具有稳定蛋白质的作用，其稳定机制可能是大分子的表面活性、优先排除、蛋白质-蛋白质相互作用的空间隐蔽、提高粘度限制蛋白质运动及优先吸附等。 7．金属离子 一些金属离子如钙、镁、锌与蛋白质结合，使整个蛋白质结构更加紧密、结实、稳定，从而使蛋白质稳定。 不同金属离子的稳定作用的浓度不同，而且种类也具有特异性。 要通过具体的实验来选择金属离子稳定剂及其浓度。 8．氨基酸 一些氨基酸单独或与其它辅料并用，通过优先排除机制稳定蛋白质。 如组氨酸、甘氨酸、天冬氨酸钠、谷氨酸及赖氨酸盐酸盐可以不同程度的抑制rhKGF在45℃、10mM磷酸钾缓冲液中的聚集。 某些氨基酸也可抑制蛋白质的化学降解，如甲硫氨酸是一种有效的抗氧剂。 （二）液体蛋白质制剂的处方组成 液体蛋白质制剂的处方组成一般如下： 活性组分、抗吸附和抗聚集剂、增溶剂、缓冲液、防腐剂（多剂量剂型）、抗氧剂、等渗调节剂和剂型载体材料。 （2）增溶剂 蛋白质特别是非糖基化蛋白质易于聚 集和沉淀，增加其溶解度的方法包括： 选择合适的pH、调节离子强度； 加入氨基酸，如赖氨酸、精氨酸（用于组织纤溶酶原激活素t-PA的增溶）； 加入表面活性剂，如十二烷基硫酸钠（用于IL-2的增溶）； 加入HP-β-CD等。 （3）缓冲液 因为蛋白质的溶解度、物理和化学稳定性都依赖于pH，所以首先应选择维持产品稳定的缓冲液，其次还应考虑离子强度（因离子强度影响制剂的稳定性和等渗）。常用的有磷酸盐、枸橼酸盐、醋酸盐缓冲液等。 （5）防腐剂 对多剂量使用的注射剂需加入防腐剂