基于弧菌毒力基因多重PCR法的建立和其在副溶血弧菌毒力基因检测中的应用.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2015, Vol.31, No.7 基于弧菌毒力基因多重PCR 法的建立及其在 副溶血弧菌毒力基因检测中的应用 1 2 3 1 2 1，4 2 冼钰茵 ，易敏英 ，魏霜 ，余翀 ，李志勇 ，吴希阳 ，凌莉 （1.暨南大学理工学院，广东广州 510000 ）（2.广东省出入境检验检疫局，广东省动植物与食品进出口技术措施研究 重点实验室，广东广州 510000 ）（3.汕头出入境检验检疫局，广东汕头 515000 ）（4.广东省食品安全卫生应急技术 研究中心，广东广州 510000） 摘要：针对副溶血弧菌常见的 11 种毒力基因（toxR、Collagenase、toxS、trh、tdh 、tlh、UreR、FlaA 、ompW 、AspA 、fur ），建 立了两套六重PCR 检测体系，应用于副溶血弧菌环境分离株和水产品分离株的毒力基因分布情况调查。在调查的248 株副溶血弧菌 中，鞭毛丝蛋白基因FlaA 、外膜蛋白基因ompW 和铁吸收调节蛋白基因fur 的分布最广（100%），其次为碱性丝氨酸蛋白酶基因AspA （99.60% ），胶原蛋白酶基因Collagenase、不耐热性溶血毒素基因tlh 以及毒力调控基因toxR 和toxS 的分布率均在90%以上且toxR 和toxS 的分布极为相似，尿素酶基因UreR 的分布极少（1.21% ），而耐热直接溶血素基因tdh 和耐热相关溶血素基因trh 在这248 株 副溶血弧菌中没有检出。本研究建立的多重PCR 检测体系能快速、高效地检测多个毒力基因的分布情况，为副溶血弧菌的毒力机制 研究和风险评估提供方法和依据。 关键词：副溶血弧菌；毒力基因；多重PCR 文章篇号：1673-9078(2015)7-309-315 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.7.048 Novel Multiplex Polymerase Chain Reaction Assay to Detect Virulence-related Genes in Vibrioparahaemolyticus 1 2 3 1 2 1,4 2 XIAN Yu-yin , YI Min-ying , WEI Shuang , YU Chong , LI Zhi-yong , WU Xi-yang , LING Li ( 1.College of Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510000, China) (2.Guangdong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangdong Key Laboratory of Import and Export Technical Measures of Animal, Plant and Food, Guangzhou 510000, China) (3.Shantou Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shantou 515000, China) (4.Food Safety and Health Emergency Technical Research Center of Guangdong Province, Guangzhou 510000, China) Abstract: Two multiplex po