我国急性白血病免疫分型四色方案.pdf

中国流式细胞术急性白血病免疫分型四色方案 由于多参数流式细胞术(MFC)免疫分型具有客观、敏感、准确等特点，免疫 表型已成为诊断急性白血病的重要依据之一。因准确的诊断需要选择一定数量的 抗体，涉及多个造血系列的抗原。但目前国内甚至国际上没有规范化的方案可以 借鉴。而国内不同的医疗单位所用的抗体数量和种类均有较大的异质性，有些单 位由于应用的抗体数量较少或抗体选择不当，影响对疾病的诊断、分期和预后的 判断。鉴于国内的实际情况，中国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组经 过多次的讨论，提出以 CD45/SSC 为基础的中国流式细胞术急性白血病免疫分型 四色方案，供参考。本方案不包括标本的采集、保存、制备、试剂和仪器的调整 及急性白血病的诊断标准，这些对免疫分型同样重要，可参考相应的指南。 1．适应范围： 1.1 急性淋巴细胞白血病(ALL): B 系：早 B 前体-ALL(Pro-B), 普通-B-ALL(Common-B),前体 B-ALL(Pre-B), 及与 Burkitt 淋巴瘤进行鉴别 T 系：早 T 前体-ALL (Pro-T), 前体 T-ALL(Pre-T),皮质-T-ALL 和髓质 -T-ALL. 1.2 急性早幼粒细胞白血病（APL ） 1.3 急性髓细胞白血病（AML ） AML 微分化型（AML-M0 ） AML 伴粒系和单核细胞分化型（AML-M1/2 和 AML-M4/5 ） 急性红白血病（AML-M6 ） 急性巨核细胞白血病（AML-M7 ） 1.4 前体树突细胞肿瘤 1.5 急性嗜碱性粒细胞和肥大细胞白血病 1.6 混合表型白血病 1.7 对上诉急性白血病治疗后检测 MRD 的标志进行筛查 2. 抗体的选择：根据检测的目的，需要检测不同的抗体： 2.1 鉴别急性、慢性白血病:对于急性髓细胞白血病，可以根据 CD45/SSC 图型进 行初步判断。髓系白血病细胞 CD45 的表达较弱，往往位于正常淋巴细胞下 方，且多数白血病细胞 SSC 较低（除去大颗粒 APL 患者）。再根据 CD34、 CD117、CD38、HLA-DR 、CD123 的表达进行判断。急性髓系白血病细胞多数表达 这些标志或只表达这些标志中的部分标志。对于淋系白血病细胞的鉴别，可以根 据 CD34、TDT、CD10，cu 、K/L 、cCD3、CD1a （CD99 ）的表达进行判断。如果 B 淋巴细胞表达 CD34 和或 TDT,则说明为幼稚 B 细胞。CD10 在 B-ALL 中表达较普遍在 部分 T-ALL 中也为阳性，但在 Burkitt 淋巴瘤,滤泡性淋巴瘤(FL)、弥漫大 B 淋巴瘤 (DLBCL)和 B 细胞淋巴瘤未分类型（BCLU）经常为阳性，这些均为周围型淋巴瘤，不表 达 CD34 和 TDT。因此，在 CD10+及 CD34 和或 TDT 阴性时，则需要检测cu 、K/L 鉴别 成熟或幼稚B 细胞，成熟B 细胞应该表达膜免疫球蛋白（Ig 及膜轻链Kappa 和lambdaL ）。 2.2 鉴别白血病细胞的系列来源：髓系及淋系（B 、T 和 NK ）。可参考 2008 年 WHO 血液和淋巴系统肿瘤分类中提出的标准。对于 B 系肿瘤细胞，在幼稚细胞比例较 低时，还应该与正常的 B 组细胞进行鉴别。这些正常 B 祖细胞在婴儿，儿童 期比例较高，在成人中一般比例较低，但在淋巴瘤、免疫性疾病，HIV 感染 者、化疗和造血干细胞移植后可出现较高比例的 B 祖细胞，此时应结合临床 及免疫表型特点加以鉴别。其鉴别要点，参考 MRD 检测中 LAIP 的表型特 征。 表 1 鉴别白血病的系列性及需要检测的抗体 髓系： MPO+(FCM、免疫组化或细胞化学) 或单核细胞分化（至少 2 个标志：NSE、CD11c、CD64、CD14、溶菌酶） T 系: cCD3(FCM 应用抗ε抗体。而免疫组化使用的多克隆抗体可与 CD3ζ链结合，非 T 细胞 特异的。 或膜 CD3(很少表达） B 系: