环境细胞微生物学 第一篇No.1.ppt

第一章 微生物的形态和构造（一）原核微生物 微生物根据其不同的进化水平和形状上的明显差别可分为原核微生物、真核微生物和非细胞微生物三大类群。 原核微生物： 细菌、 放线菌、 蓝细菌、 支原体、 立克次氏体 衣原体 第一节 细菌 细菌：是一类细胞细而短（细胞直径约0.5μm，长度约0.5~5 μm）、结构简单、细胞壁坚韧、以二等分裂方式繁殖和水生性比较强的原核微生物。 一、细菌的形态构造及其功能 （一）形态和染色 细菌的形态基本上只有三大类： 球状、杆状、螺旋状 球菌(coccus):?单球菌；双球菌；链球菌；四联球菌；八叠球菌；葡萄球菌 杆菌(bacillus): 杆菌细胞呈杆状或圆柱形：长杆菌、短杆菌、梭状杆菌 螺旋菌(spirilla) :细胞呈弯曲杆状的细菌统称为螺旋菌。弧菌、螺菌、螺旋体 螺旋不满一周称为弧菌， 满2~6环的称为螺菌， 6环以上称为螺旋体。 特殊形态细菌 最小的细菌 纳米细菌：细胞直径最小为50纳米 1996年在火星陨石中发现的一种直径10纳米的微小化石成分很可能是一种纳米细菌 地下发现的超微型细菌，为正常细菌大小的1% 细菌的染色 由于细菌的细胞极其微小又十分透明，用水浸片观察法在光学显微镜下观察时，只能看到大体形态和运动的情况。 若要在光学显微镜下观察其细致形态和主要构造，一般都要对它们进行染色。 简单染色法简单染色法又叫作普通染色法，只用一种染料使细菌染上颜色，如果仅为了在显微镜下看清细菌的形态，用简单染色即可。 复杂染色法 用两种或多种染料染细菌，目的是为了鉴别不同性质的细菌，所以又叫鉴别染色法。 主要的复染色法有: 革兰氏染色法 抗酸性染色法 复杂染色法 革兰氏染色法：不仅能观察到细菌的形态，而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。细菌对革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。 Gram stain革兰氏染色法 准备：拭净玻片。 以无菌操作制作涂片，干燥，热固定后备用。 初染：結晶紫染色1分钟。水洗去掉浮色。 媒染：碘液（碘-碘化钾）染色1分钟。 脫色：以95%乙醇脱色10-30sec，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色呈无色。 复染：以番紅复染1分钟，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌呈现红色。 革兰氏染色的意义 分类鉴定菌种时的重要指标：通过这一染色，可把几乎所有的细菌都分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异，因此，革兰氏染色可提供不少重要的生物学特性方面的信息。 1、细胞壁 细胞壁（cell wall）是包围在细菌体表最外层的、坚韧而有弹性的薄膜。 化学组成：主要成分是肽聚糖（肽聚糖是由两种氨基糖和氨基酸组成的一个坚韧的多聚体结构） 肽聚糖 革兰阳性菌 聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥 三维立体结构，坚固 40层左右 革兰阴性菌 聚糖骨架、四肽侧链 二维平面结构，疏松 1～2层 革兰氏阳性细菌细胞壁 壁厚，20~80纳米，结构简单， 含肽聚糖、磷壁酸 革兰氏阴性细菌细胞壁 较薄，10纳米，结构复杂 分为外壁层和内壁层 外壁层分为：外层脂多糖，中间磷脂层，内层为脂蛋白 内壁层含肽聚糖，不含磷壁酸 革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较 1、细胞壁 功能：细菌细胞壁的生理功能有：????1)??保护原生质体免受渗透压引起破裂的作用；????2)??维持细菌的细胞形态(可用溶菌酶处理不同形态的细菌细胞壁后，菌体均呈现圆形得到证明)；????3)??细胞壁是多孔结构的分子筛，阻挡某些分子进入和保留蛋白质在间质(革兰氏阴性菌细胞壁和细胞质之间的区域)；????4)??细胞壁为鞭毛提供支点，使鞭毛运动。 革兰氏染色机理 革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分基础上的一种物理原因。 革兰氏染色机理 通过初染和媒染操作后，在细菌的膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的大分子复合物。革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密，故在用乙醇脱色时，肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩，再加上它基本不含类脂，故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙，因此结晶紫与碘的复合物会牢牢阻留在其细胞壁内，使其呈现紫色。 革兰氏染色机理 反之，革兰氏阴性菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交联松散，故遇乙醇后，肽聚糖网孔不易收缩，加上它的类脂含量高，所以当乙醇把类脂溶解后，在细胞壁上就会出现较大的缝隙，这样结晶紫与碘的复合物就极易被溶解出细胞壁，因此，通过乙醇脱色后，细胞又呈无色。这时