泌尿外科解剖及生理.ppt

泌尿系统解剖与生理 泌尿系统的解剖 肾上腺的解剖 二、肾上腺的生理 肾脏的解剖与生理 肾的毗邻（前面观） 肾的毗邻（后面观） 肾蒂的结构和排列 肾血管与肾段 肾静脉 肾的被膜 肾的被膜（纵面观） 输尿管的解剖 输尿管动脉 腹膜后大血管 膀胱的位置与毗邻 膀胱的血供 前列腺的位置 MDR的基本概念 MDR是指抗某种细胞毒药物的耐药细胞系对许多结构上无关的和作用机制不同的其它抗癌药物产生的交叉抗药性,是一种独特的广谱耐药现象 经 典 M D R MDR1的基因产物 一种细胞膜糖蛋白 称为P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp) 分子量为170KD(P170) P-gp具有能量依赖性“药泵”功能 表达水平与耐药程度成正比 P-gp介导的抗癌药物 阿霉素、柔红霉素、表阿霉素 米托蒽醌 长春花碱、长春新碱 乙托泊苷（Etoposide） 紫杉醇、泰素帝 Actinomycin D HIF-1α蛋白表达与P53过表达关系 谢谢! THANK YOU! Till Acker ，et al. A role for hypoxia and hypoxia-inducible transcription factors in tumor physiology。 J Mol Med , 2002, 80:562–575. 缺氧诱导因子－1（Hypoxia inducible factor 1, HIF-1） HIF-1α 活性调节亚单位 HIF-1β 可能与稳定HIF-1及二聚化有关 2. HIF-1α结构功能代谢及其靶基因 缺氧诱导因子1－α的代谢 缺氧 癌基因激活 HER2 FRAP HRAS CSRC 抑癌基因失活 VHL PTEN p53 生长因子或细胞因子 IGR、Insulin、EGF、IL-1 HIF-1α的表达调节因素 二. 研 究 现 状 1. HIF-1α在肿瘤细胞中表达位于细胞核内. 2.HIF-1α在多种肿瘤中的表达 ,在肿瘤 附近正常组织中不能测及 . 3.在结肠癌、肺癌、乳腺癌及前列腺癌的研究中发现，HIF-1α蛋白表达随乳腺癌恶性度升高而增加，且与浸润、淋巴结转移有关 4. 发现HIF-1α-/-组剂量反应曲线较HIF-1α+/+组明显左移,IC50也显著减少. 5.对肿瘤细胞的研究发现HIF-1α-/-肿瘤细胞对放疗和化疗药物的敏感度都有所增加。 6.多药耐药基因MDR1是 HIF-1α的靶基因。 7.利用乏氧诱导肺腺癌细胞459表达HIF-1α，发现p-gp和MRP随着HIF-1α表达而增加，并且对表阿霉素和顺铂的耐药性增强。 8.国外的研究也发现，缺氧能导致p-gp和HIF-1α过表达，从而产生对VP-16、博莱霉素和蒽环类耐药。 9.国外对卵巢癌的研究已表明突变型P53过表达会引起HIF-1α表达升高. 待解决问题 目前关于HIF-1α与胃癌生物行为及多药耐药机制关系的研究报道甚少。 目前对于HIF-1α与ＭＤＲ的研究多用基因转染方法，应用原代胃癌体外细胞药物敏感性进行研究的报道甚少． 三.研究目标和研究内容 1. 研究目标 研究HIF-1α蛋白表达与p-gp表达的相关性，探讨其与胃癌细胞多药耐药的关系。 探讨HIF-1α表达与胃癌生物学行为的关系 . 探讨HIF-1α蛋白表达与突变P53过表达的相关性 . 2. 研究内容 １对６０例新鲜胃癌标本进行细胞纯化，短期原代培养，应用流式细胞技术和MTT法检测其对常用化疗药物的敏感性． ２应用免疫组化技术检测60例胃癌石蜡标本P53、P-gp、HIF-1α蛋白表达，并收集临床病理资料。 ３应用RT-PCR方法检测相同60例新鲜胃癌细胞HIF-1αmRNA的表达水平。 ４应用TUNEL、荧光显微镜等方法检测化疗药诱导胃癌细胞凋亡后的形态学改变。 四. 技术路线 HIF-1αRT-PCR 免疫组化 胃癌手术标本 细胞分离、短期培养 ＭＴＴ及流式技术检测化疗药物体外敏感性 HIF-1α、p-gp 、P53 免疫组化 化疗药诱导胃癌细胞凋亡后形态学改变 对结果进行统计分析 五. 本课题的特点 从细胞缺氧角度探讨HIF-1α蛋白表达与p-gp表达的相关性，探讨其与胃癌细胞多药耐药的关系。国外有类似研究，国内未见报道 关于HIF-1α表达与胃癌生物学行为的研究国内未见报道。 新颖性 关于胃癌中HIF-1α蛋白表达与P53过表达 关系在国内未见报道 实用性 探讨HIF-1α蛋白表达