第8沼肼—分离分析法导论.pptVIP

第八章 分离分析法导论;一、色谱分析法及其基本概念;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Developing of Chromatographic Technique;Developing of Chromatographic Technique;Developing of Chromatographic Technique;2、色谱法分类;（3）按分离原理分;3、色谱图及常用术语;（2）常用术语;③保留值：表示试样中各组分在色谱柱内停留状况的指标，反映组分分子与固定相分子间作用力的大小，通常用时间和流动相的体积表示。;色谱峰的个数——判断组分的个数 色谱峰的保留值——定性分析 色谱峰的面积或峰高——定量分析 相对保留值?——固定相与流动相的选择是否合适 保留值、区域宽度——评价色谱柱分离效能的好坏;（3）分配平衡; 样品在固定相与流动相之间进行分配，很快达到平衡，即分配平衡。当流动相流过时，样品将在流动相和新的固定相中又??到分配平衡，同时原来仍在固定相中的样品与新的流动相之间也会形成新的分配平衡，随着流动相的不断流过，它们携带发生分配平衡后仍存在于流动相中的样品沿着柱子向前流动，从而达到不同组分分离的目的。;分配比影响因素：组分、流动相和固定相的热力学性质；温度和压力等因素；流动相及固定相的体积。;A,B组分未分离;1、塔板理论;理论优点：解释了流出曲线的形状，提出了计算和评价柱效能高低的因素（n ） 如果若tR一定，那么n越大，H越小，则色谱峰越窄，柱效能越高。 理论缺点： （1）色谱过纵向扩散等不能忽略， （2）塔板理论只能定性地给出板高的概念，不能解释板高受哪些因素影响，无法提出降低塔板高度的方法 （3）不能说明为什么在不同的流速下，可以测得不同的理论塔板数 （4）分配系数与浓度无关只能在有限的浓度范围内成立 （5）色谱柱中没有真正的平衡体系;2、速率理论;A-涡流扩散项;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;B/u-分子扩散项（纵向扩散项）;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Cū-传质阻力项;Cm：流动相传质阻力项系数，即为待测试样组分从流动相移动到固定相表面的进行分配时所受到的阻力;范氏方程;柱效：色谱分离的动力学因素，由理论塔板数来衡量。如果若tR一定，那么n越大，H越小，则色谱峰越窄，柱效能越高。 选择性：两峰间的距离衡量色谱的选择性，距离越大选择性越好，一般以?表示;分离度; n越大，R越大——n=L/H， (R1/R2)2 = n1/n2 = L1/L2 增加柱长的色谱柱可以提高分离度，但延长了分析时间。 制备一根性能优良的柱子，通过降低板高，以提高分离度。;已知物质A和B在一根30.00 cm长的柱上的保留时间分别为16.40 min和17.63 min。不被保留组分通过该柱的时间为1.30 min。峰底宽度分别为1.11 min和1.21 min，计算：（1）柱的分离度；（2）柱的平均塔板数；（3）达到1.5分离度所需的柱长度。;三、色谱的定性分析和定量分析; 例：确定物质i在某固定液X上的保留指数IiX 的数值。;利用质谱定性;基本原理：质谱分析是将样品转化为运动的带电气态离子碎片，于磁场中按质荷比(m/z)大小分离并记录的分析方法。;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;2、色谱定量分析;（1）校正因子;（2）定量方法;内标法：将一定量的纯物质作为内标物加入到准确称量的试样中，根据试样和内标物的质量以及被测组分和内标物的峰面积或峰高求出组分的含量;内标物要求： 试样中不存在 性质与被测物相近，能完全溶于样品中，但不与样品反应 内标物的峰与试样各组分的峰完全分开，且尽可能与待测组分峰接近 内标物质量与被测物质量相近;外标法（标准曲线法）