第十与五章 色谱分析法导1.pptVIP

第十五章 色谱分析法导论;§15-1 概 述; 作用机理：分配 吸附 离子交换 π－π 相互作用 被分析物：无色和有色化合物 （80％的有机化合物） ;图15-2 气相色谱仪;二、色谱法的分类 1.按两相所处的状态分类 按流动相的状态分类：气相色谱法、液相色谱法和超临界流体色谱法。 气相色谱：气固色谱 气液色谱 适用于气体和低沸点有机化合物的分析，仪器简单，操作方便，应用广泛。可在不同操作温度条件下使用。 ; 液相色谱：液固色谱 液液色谱 适用于高沸点、不易气化的、热不稳定及生物活性物质的分析，通常在室温条件下工作。 超临界流体色谱 2.按固定相所处的外形分类 按分离柱不同可分为：柱色谱和平板色谱。 柱色谱又分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 平板色谱又分为：薄层色谱和纸色谱。 ;3.按组分在两相间的分离机理分类 吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、空间排阻色谱、超临界色谱、高效毛细管电泳。; 三、色谱法的特点 1.分离效率高：能在较短的时间内分离复杂混合物、性质相近的有机同系物及旋光异构体等。 2.灵敏度高：可以检测出μg·g-1(10-6)级甚至ng·g-1(10-9)。 3.分析速度快：一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 4.应用范围广：几乎能分析所有的化学物质，无论是气态，液态还是固态。 缺点：组分的定性较为困难。 色－质，色－红联用可解决这个问题。;§15-2 色谱分离原理;图15-4 气相色谱分离过程; 气相色谱分离过程 当试样由载气携带进入色谱柱与固定相接触时，被固定相溶解或吸附。 随着载气的不断通入，被溶解或吸附的组分又从固定相中挥发或脱附，挥发或脱附下的组分随着载气向前移动时又再次被固定相溶解或吸附。 随着载气的流动，溶解、挥发，或吸附、脱附的过程反复地进行。由于组分性质的差; 异，固定相对它们的溶解或吸附能力将不同。 易被溶解或吸附的组分，挥发或脱附较难，随载气移动的速度慢，在柱内停留的时间长。反之，不易被溶解或吸附的组分随载气移动的速度快，在柱内停留的时间短。所以，经过一定的时间间隔后，性质不同的组分便彼此分离。 ;二、分配系数和分配比 1.分配系数K 组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附，或溶解、挥发的过程叫做分配过程。在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度比，称为分配系数，用K表示，即： ;K值相差越大，越容易实现分离。试样一定时， K值主要取决于固定相性质，选择适宜的固定 相可改善分离效果。 2.分配比k 在一定温度和压力下，组分在两相间分配达到平衡时，分配在固定相和流动相中的总量之比，用k 表示： ;三、气相色谱流出曲线 1.基线 色谱柱中仅有流动相通过检测器时，检测到的信号。 2.峰高 从色谱峰顶点到基线之间的垂直距离（h）。 3.区域宽度 用来衡量色谱峰宽度的参数，有三种表示方法 （1）标准偏差（?）：即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。 ;图15-5 气相色谱流出曲线;（2）半峰宽（Y1/2）：色谱峰高一半处的宽度 Y1/2 =2.354 ? （3）峰底宽（Wb）：Wb = 4? 4.保留值 （1）用时间表示的保留值 保留时间(tR)：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间。 死时间(tM)：不与固定相作用的气体（如空气）的保留时间。 调整保留时间( )： = tR－tM ;（2）用体积表示的保留值 保留体积(VR)：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所通过的流动相体积 VR = tR×F0 （ F0为色谱柱出口处的流动相体积流速，单位：mL · min-1） 死体积(VM)：色谱柱内未被固定相占据的空隙体积 VM = tM ×F0 调整保留体积( )： = VR －VM ;（3）相对保留值 r21 组分2与组分1调整保留值之比： 相对保留值只与柱温和固定相性质有关，与其他色谱操作条件无关，它表示了固定相对这两种组分的选择性。 5.保留值与分配系数K的关系 6.保留值与分配比k的关系 ;从色谱流出曲线中，可得到许多重要信息： （1）根据色谱峰的个数，可以判断样品中所含组分的最少个数 （2）根据色谱峰的保留值，可以进行定性分析 （