脂肪酶活力测定方法改进2.pdfVIP

第 卷第 期 通 化 师 范 学 院 学 报 ! #$% ! ’$ 年 月 ’ !(() ** +,-.’/0 ,1 2,’34-/ 25/645.7 6,00535 ’$8 !(() !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 脂肪酶活力测定方法的改进 纪建业 （通化师范学院化学系，吉林通化 *9:((! ） 摘 要：改进了传统测定脂肪酶活力的方法，探讨了脂肪酶的活力测定的最适应条件 改进后的 方法不需要制备乳化液，采用了分光光度法测定生成的脂肪酸，提高了灵敏度 关键词：脂肪酶；活性测定；温度； 值 ;4 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） ,!9 / *(( = ?: !(() ( = (()* = (9 酶是具有生物活性的物质，其催化性能与酶的质量多少无关，仅决定于其活性的大小 温度过高（一般超过 ），酸碱度 )( @ 过大，极少量抑制剂的引入等都会使酶变性、失活、降低或失去其催化性能，这就给酶的活性测定带来了诸多的困难和难度 传统的脂肪酶的测定方法中，需要制备聚乙烯醇橄榄油乳化液，产生的脂肪酸用标准碱溶液滴定 本实验中没有制备橄榄油 乳化液，采取将底物橄榄油直接加入到含有脂肪酶的缓冲溶液中，进行均匀磁力搅拌，产生脂肪酸用分光光度法检测 * 试剂与仪器 磷酸二氢钾（分析纯，沈阳市试剂一厂）；氢氧化钠（优级纯，北京化工厂）；乙酸铜（分析纯，北京化工厂）；吡啶（分析纯，天 津市天大化工实验厂）；苯（分析纯，天津市化学试剂一厂）；油酸（化学纯，天津市化学试剂公司分装厂）；橄榄油（化学纯，上海 化学试剂公司分装厂）；脂肪酶（粗品，北京微生物研究所）；水（去离子水，东北师范大学化学系）；盐酸（分析纯，长春市化学试 剂厂）；分光光度计（ 型，上海第三分析仪器厂）；酸度计（ 型，上海雷磁仪器厂）；磁力搅拌器（ 型，江苏省 !! ;47 = 9A B6+ = (! 泰县分析仪器厂）；超级恒温槽（ 型，重庆实验设备厂）；离心沉淀器（ 型，上海手术器戒十厂）；分析天平（ 型， 67)(