苯并噻唑类核酸分子荧光探针的合成及光谱性质.pdfVIP

第29卷 第8期 应 用 化 学 V01．29Iss．8 2012年 8月 CHINESEJ0URNALOFAPPLIEDCHEMIS RY Aug．2012 苯并噻唑类核酸分子荧光探针的合成及光谱性质 陈秀英 郭 琳 郑昌戈 高海燕 安 文 (江南大学化学与材料工程学院 无锡214122) 摘 要 设计合成了3种两端杂环氮原子上具有不同取代基的苯并噻唑类不对称三甲川菁染料，并对染料的 结构进行了表征。测试了染料在乙醇中的吸收和荧光发射光谱，染料的最大吸收值和荧光发射值分别在 629～635nm和656—672nlTl之间。染料8、9和 1O的斯托克斯位移分别为23、37和27nm。染料在溶剂中基 本无荧光，荧光量子产率小于0．021，可以极大的降低染料 自身的荧光背景干扰。染料的光降解实验表明，两 端杂环氮原子苄基取代后可以明显增强染料的光稳定性。测试循环伏安曲线得到染料的氧化电位分别为 0．535、0．456和0．399V，氧化电位越大，光降解速率常数越小，与光降解实验得到的降解速率常数结果一致。 关键词 苯并噻唑菁染料，核酸探针，光降解，循环伏安，疾病诊断 中图分类号 ：0626 文献标识码：A 文章编号：1000-0518(2012)08-0892-06 DOI：10．3724／SP．J．1095．2012．00441 核酸作为生命遗传物质，其定量分析、特异识别，对基因组学的发展、功能基因的研究、基因技术的 应用等具有十分重要的意义。20世纪6O年代有学者相继发现，吖啶橙、溴化乙啶嵌入DNA的双螺旋碱 基中，可以形成强荧光化合物。但它们的主要缺陷是染料具有很强的毒性，且染料本身会带来较强的荧 光背景干扰 ¨j。噻唑橙染料是由Lee等 发现的一类用于网状红细胞分析的菁染料，该类染料能渗透 膜，与RNA结合后荧光显著增强，已经取代了传统荧光染料并被研究者所熟悉和使用L3引。噻唑菁类染 料在游离状态下几乎无荧光，在荧光检测时可以避开染料 自身的荧光干扰，提高了检测灵敏度，减少了 标记过程中除去游离染料的复杂步骤 j。随着分子生物学、诊断学的不断发展，对荧光试剂的荧光性能 要求越来越高，因此研究开发出性能优异的新型荧光染料成为学者们关注的热点。噻唑菁染料核酸探 针是非共价结合探针，常见的染料结构含有噻唑环和喹啉环，环之间通过亚 甲基链共轭连接起来。中间 亚甲基链上碳原子个数不同，其光谱性质不同。中间亚甲基链上为3个碳原子的染料，文献报道较少。 本文以苯并噻唑为原料，合成了含有不同取代基的噻唑类不对称三甲川菁染料，研究了取代基对光谱性 质和光稳定性的影响。染料的分子结构如Scheme1所示。 一 R2 R2 CH2C6H5 R2CH2C6H5 R2 CH3 Scheme1 Structuresofthedyes 1 实验部分 1．1 仪器和试剂 紫外．可见吸收光谱在北京谱析通用仪器有限责任公司TU一1901型双光束紫外一可见分光光度计上 2011-09-30收稿，2011-11-25修回 国家自然科学基金资助项 目，中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP211AI2，JUSRP21110) 通讯联系人：陈秀英，副教授；Tel：0510Fax：0510E—mail：chenxiuying1975@163．corn；研究方向：精细化学品及 有机发光材料 第8期 陈秀英等：苯并噻唑类核酸分子荧光探针的合成及光谱性质 测得；美国Varian公司CaryEclipse型荧光光谱仪；核磁(HNMR)数据在德国Bruker公司AVANCE-Ill 型400MHz全数字化核磁共振谱仪 (TMS为内标)测得；