包括选修本i专题3和选修本iii专题21.ppt

植物细胞工程 包括选修本I专题3和选修本III专题2.1 一、植物细胞工程的理论基础……细胞全能性 （1）概念： 已分化的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。 （2）基础： 生物体的每一个细胞都含本物种的全套遗传物质，都有发育成完整个体的全套基因。 （3）实现条件： 离体、提供营养物质、激素及其他适宜条件。 （4）全能性的比较 受精卵 生殖细胞 体细胞 植物细胞﹥动物细胞 二、细胞分化 1、概念： 在生物的个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程。 2、特点： A。持久性 B。稳定性 3、实质： 是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果 在个体发育的不同时期，生物体不同部位的细胞表达的基因是不相同的，合成的蛋白质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。 为什么动物体细胞的细胞核具有全能性？ 因为细胞核内含有保持物种遗传性所需要的全套遗传物质 4、细胞分裂和细胞分化的比较： 三、植物组织培养 1、概念： 在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。PIII36 2、过程： （1）、外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。PI34 （2）、愈伤组织：细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 （3）、脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程。 （4）、再分化：脱分化产生的愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程。PI32 3、影响植物组织培养的因素：PI33 （1）植物材料的选择：直接关系到实验的成败。 （2）营养因素：需要配制适宜的培养基，保证营养的供应，常用MS培养基。 （3）使用激素进行调节：生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。要注意激素的浓度、使用的先后顺序及用量的比例。 （4）环境条件的控制：注意控制pH、温度、光照等外界条件。 MS培养基： （1）大量元素：C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg； （2）微量元素：Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Co、I； （3）有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素及蔗糖等。 你能说出各种营养物质的作用吗？ 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐； 蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压； 甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 植物激素调节： （1）、在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势； （2）、使用顺序影响实验结果： （3）、激素用量的比例影响实验结果： 生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化，抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。 4、植物组织培养的实验操作 （1）制备MS固体培养基： （2）外植体消毒： （3）接种： 将外植体插入锥形瓶的培养基中，注意消毒和用封口膜扎好。 （4）培养： 将锥形瓶最好放在无菌箱中培养，注意定期消毒，控制适宜温度，适时光照。 （5）移栽： 将试管苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活，长壮后再移栽到土壤中。 （6）栽培： 对移栽幼苗适时浇水、施肥，并观察生长情况。 （7）结果分析与评价： 制备MS固体培养基： （1）配制各种母液：大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍；激素类等按1mg/Ml质量浓度单独配制成母液。 （2）配制培养基：按比例配制各种所需成分，依需要决定是否加入植物激素； （3）灭菌：将培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌。 外植体消毒：依下列顺序进行消毒： 流水冲洗→洗衣粉洗→流水冲洗→无菌吸水纸吸干→70%酒精→无菌水冲洗→无菌吸水纸吸干→0.1%氯化汞溶液→无菌水冲洗 结果分析与评价 1、观察外植体的生长情况，统计有多少外植体被污染，分析被污染的原因？ 2、观察茎段的分化情况，填好结果记录表，并分析结果。 3、幼苗移栽后，能否正常生长？分析原因。 思考题 选修本1P35：你打算做几个重复组？你打算设置对照实验吗？ 每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 在选取菊花茎段的时候，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？其他部分（如根、茎、叶、花）是否也能培养成小植株？ 外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。其他部分（如根、茎、叶、花）也能培养再生形成小植株，只是诱导愈伤组织比较困难。 在植物组织培养的过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操