神经组织扫描电镜标本制备.pdfVIP

电子显微学报 A B C-14 B D/(E,= B 1E=F2E B $FE B 55（） 年 @ G@’? @’? 58 @’? 六甲基二硅胺烷（ ）结合真空干燥法 !#$ 在神经组织扫描电镜标本制样中的应用 张 辉，孙异临，曲宝清 （北京神经外科研究所，北京 %’ ） 神经组织的扫描电镜观察以往都采用临界点干 处理时要尽量减少标本表面收缩等人为的损伤。 燥法，但此方法存在操作复杂，需要专用仪器设备等 在扫描电镜样品制备中，多数采用临界点干燥 诸多不便。我们在工作中探索了用六甲基二硅胺烷 法，其温度、压力及时间需严格控制；每干燥一次样 （ ）对样品进行干燥，并与 品所需时间较长（约 ）；由于受样品室容积的 !()*+(,-./ 0121/*3*4( !#$ 5 8- 临界点干燥法作了比较，结果是令人满意的。 限制，一次不能干燥大量的样品，否则会把大量的醋 材料与方法 酸异戊酯带入样品室，使得样品不能充分干燥。此 样品取自人或动物的神经组织，培养的神经细 外，在干燥过程中，当从高压转变为大气压时，标本 胞等。取材后立即置入 戊二醛固定 ，经磷 有可能因减压而发生膨胀。我们推荐的六甲基二硅 5 6’ 7 5- 酸缓冲液冲洗 次，随后进行 四氧化锇（含 胺烷法克服了上述的一些不足之处，六甲基二硅胺 8 %7 %7 铁氰化钾）后固定 ，经双蒸水冲洗后常规梯度乙 烷为低表面张力的无色透明液体，是用于消减气相 5- 醇脱水，用六甲基二硅胺烷（ 色谱载体表面吸附活性的扫尾剂，该物质与空气接 !()*+(,-./ 0121/*3*4( !#$ ）干燥（视标本大小决定干燥的时间）。经 触后迅速被水解生成三甲硅烷醇和六甲基二硅醚， !#$ 处理过的样品再置入真空干燥瓶中，在低真 能溶于多种有机溶剂。由于六甲基二硅胺烷的这种 空状态下使!#$ 逐渐挥发，使样品彻底干燥。经 性质，决定其能迅速将样品中的脱水剂及残留水份 9: 999 型离子镀膜仪喷镀，最后在日立$;’5 型扫描 置换，使样品快速、充分干燥，从而免受大气压力对 电镜下观察。 组织的损伤，使神经组织的三维立体微细结构保存 结果与讨论 在活体状态。六甲基二硅胺烷干燥法操作简单，脱 神经组织与其它部位器官组织相比，其特点为 水后样品在!#$ 中浸泡’ %+14 即可。 含水量较多、质地软、易变形，因此在样品脱水、干燥 图 用 干燥法制备的视网膜细胞（ ）。 % !#$ :*= % + ! 图 用 干燥法制备的室管膜细胞（ ）。