第7章农业生物工程动物生物工程西南大学普通生物学.ppt

5、 性别鉴定 在移植前对胚胎进行性别鉴定。 利用DNA标记技术 * 第二节 动物生物技术 表达外源基因导入动物，产生的能表达外源基因的动物。 一、 动物转基因技术 转基因动物（transgenic animal） （5）检测新基因的遗传性和表达能力。 　1、动物转基因的步骤 （1）鉴定和构建外源基因； （2）外源基因导入受精卵； （3）转基因受精卵移植到母体子宫； （4）胚胎发育； 　　 20世纪80年代，我国朱作言首次用人的生长激素基因（AGH）构建了转基因金鱼。 2、转基因动物 （1）转基因鱼 　　目前已有鲫鱼、鲤鱼、泥鳅、鳟鱼、大马哈鱼、鲶鱼、罗非鱼、鲂鱼等各种淡水鱼和海鱼被用于转基因研究。 提高生长速度和抗逆性 已有多种哺乳类和鸟类的基因被成功地整合到鱼类 转羊生长激素基因鲤鱼，转人生长激素基因鲤鱼、鲫鱼、泥鳅、鲂鱼，转大麻哈鱼生长激素基因鲤鱼等。 例如 提高生长速度 　　生长在北美的美洲拟鲽的抗冻蛋白基因导人虹鳟、鲑鱼。 提高抗性 抗冻蛋白基因被用来提高鱼类的抗寒能力 反义RNA技术提高抗病性 　　家禽卵的受精是在排卵时发生，受精卵从输卵管排出需要20多小时，此时已经开始卵裂，产出时的卵已有6000多个细胞。 （2）转基因家禽 转基因动物的常规操作很困难用于家禽 转基因家禽目前只见到转基因鸡获得成功的报道。 　　受精后第一次卵裂前取出单细胞卵，在体外进行转基因，然后用代用蛋壳在体外培养至孵化。 产出前操作 　　Perry和Sang等（英国）用体外显微操作注射外源DNA，获得转基因鸡。 原生殖细胞是鸟类配子的前体，原生殖细胞可以从一个胚胎转到另一个胚胎发育。 蛋产出后操作 载体有多种 胚胎干细胞法 原生殖细胞（primordial germ cell，PGC）法 用鼠的抗流感病毒基因Mxl导入鸡胚的成纤维细胞，细胞表现对流感病毒的抗性。 转基因家禽技术 以提高抗病性和改良生产性状为主要目标 例如 许多与鸡繁殖和生长有关的激素和生长因子基因已被克隆，已将牛生长激素基因导入鸡，获得高水平表达牛生长激素的鸡，体重大于对照组。 为转基因家畜的成功提供了有效的技术手段。 （3）转基因家畜 转基因猪、牛、马、羊、兔等 哺乳动物体外受精和胚胎移植技术 转生长激素基因以提高生长速度 饲料转化率、增重率提高，脂肪减少。转基因的猪的抗流感病毒能力增强。 转生长激素基因的猪 转基因猪解决器官移植中的超敏排斥反应 转牛生长激素基因提高牛奶产量 　　对哺乳动物的排卵、受精、胚胎早期发育等繁殖过程进行人工操作的现代生物技术。 二、 胚胎工程 转基因技术 主要包括 冷冻保存技术 胚胎移植 体外生产胚胎 胚胎克隆 性别鉴定 1 、 冷冻保存技术 （1）精液保存技术 （2）胚胎冷冻技术 1000只牛胚胎连同冷冻容器总重量不超过50kg。 现在已有鼠、兔、牛、羊等十多种动物胚胎冷冻成功。 包括卵母细胞体外成熟，体外受精和胚胎培养。 3 、体外生产胚胎 体外生产胚胎的意义 第一，提供大量胚胎进行商业性胚胎移植 第二，为克隆胚胎提供核受体， 第三，提供大量知道准确发育时期的胚胎。 胚胎切割前的体外早期培养 体外生产胚胎的工艺过程 （1）卵母细胞体外成熟 体外培养胎儿卵巢可不断产生卵母细胞 牛、绵羊、猪和山羊的受精率已高达70％-80％ （2）体外受精 （3）胚胎培养 体外生产胚胎用于 移植胚 细胞核移植 胚胎分割和冷冻 核移植 4、 胚胎克隆 提供遗传上完全相同的个体 胚胎克隆的方法 胚胎分割 猪、绵羊经胚胎分割已经产出同卵双胞胎。 （1）胚胎分割 把二细胞至囊胚阶段胚胎一分为二 牛的胚胎分割已经广泛应用 目前 　　指将胚胎细胞核经显微手术和细胞融合的方法移植到去核卵母细胞中，重组胚胎发育至产仔的过程。 （2）细胞核移植 小鼠、绵羊、牛、兔和山羊都有核移植的后代。 体内胚胎和体外胚胎细胞核移植均已成功， 牛冷冻胚胎细胞核移植也已成功。 sheep cow *