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缺血修饰白蛋白的临床研究与应用进展2
2. 由遗传引起的HSA氨基端两个氨基酸残基缺失会出现假阳性,而且人群中的这种缺失频率尚不清楚。 3. 在下列情况下IMA可能出现假阳性结果:脑缺血(卒中)、某些肿瘤、急性感染、终末期肾病、肝硬化等。 4. IMA检出灵敏度很高(80%),但特异性不高(46%)。 5. IMA能很好区分有无心肌缺血的患者,但很难区分有无MI的心肌缺血患者。 IMA检测标本采集与处理 受检者的准备:病人采集静脉血样 ; 如果病人服用抗凝血药物,血液在30分钟内不能凝固,结果解释应慎重。血清应通过物理方法尽快与血细胞分离。推荐时间最长不要超过2小时; 静脉采血: 除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。 标本处理 :血样采集后,应及时离心分离血清,血清样本应不溶血。测试尽可能在血液提取后2.5小时内完成;如果测试不能及时完成,必须立即在-20℃或更低温度下冷冻血清;解冻冻结的样品需在2~8℃或室温下进行,应充分混合,测试必须在样品解冻后1.5小时内获得,不得含有EDTA、枸橼酸钠等鳌合剂的抗凝剂 ACB与IMA的区别 ACB-白蛋白钴结合力:直接反映每毫升血清中白蛋白结合钴的能力。ACB越高说明白蛋白结合钴的能力越高,间接反应为血清中IMA越低,反之,ACB越低说明IMA越高。 IMA的计算是通过检测ACB间接获得的,它是通过对IMA单位定义换算得来。 谢谢! * 缺血修饰白蛋白的临床研究与应用进展 中南大学湘雅二医院检验科 蒋洪敏 概述: 目前临床应用的心脏标志物种类繁多,大致有: 反映心肌组织损伤的标志物:CK-MB、Mb、cTn 反映心肌缺血的标志物:IMA、PAPP-A、NEFA、 胆碱、CD40配体等。 反映心脏功能的标志物:B-BNP、NT-proBNP等 心血管炎症的标志物等:CRP 、IL-6、α-TNF等。 2007年6月4日卫生部关于印发《医疗机构临床检验项目目录》的通知中确定了目前各医疗机构可以开展的有关心肌疾病的实验诊断项目有:肌酸激酶同工酶MB、α-羟丁酸脱氢酶、肌钙蛋白T、肌钙蛋白I、肌红蛋白、缺血修饰白蛋白、脑钠肽、N端-前脑钠肽、妊娠相关蛋白、同型半胱氨酸。 缺血修饰白蛋白(Ischemia Modified Albumin,IMA) 1999年Bar-Or等观察到不稳定心绞痛和心肌梗死发病早期患者的人血清白蛋白(Human serum albumin, HSA) N 末端部份分子显著改变或丧失,使外源性钴与人血清白蛋白结合能力降低。其N-末端受损或铜离子占据的HSA称为缺血修饰白蛋白(ischemia modified albumin, IMA)。 IMA形成机制 Droy通过化学方法生成ROS并利用· OH 清除剂巯丙酰甘氨酸(mercap top rop ionylglycine, MPG) 体外模拟IMA的形成过程, 发现通过Fenton反应产生·OH的一组血清中的IMA迅速升高。在15min的反应过程中, IMA吸光值比基线水平最大增高43.6% , 而另一组中加入·OH清除剂后, IMA 产生的量与血清对照组(不加入任何试剂) 无明显差别。说明ROS, 尤其是·OH 可能改变白蛋白的化学结构,导致IMA的产生。 IMA的测定 ACB试验是利用IMA结合过渡金属Co2+的能力减弱的性质进行测定。正常血清标本中白蛋白以活性形式存在,加人氯化钴溶液后, Co2+即可与白蛋白N末端结合,溶液中存在的游离Co2+浓度较低;而缺血个体的血清标本中含有较多IMA,加人同样浓度的氯化钴溶液,由于IMA与Co2+结合的能力弱,溶液中存在较高浓度的游离Co2+ 。利用二硫苏糖醇(DTT)可以与游离Co2+产生红色反应,IMA含量与颜色程度呈正比,在470~505nm处检测吸光度,可间接对IMA进行定量测定。 临床研究 Cho最新报道, IMA在急性冠脉痉挛诱发的短暂性心肌缺血中明显升高, 是一种灵敏度很高的心肌缺血标志物。研究对象为26名接受麦角新碱激发实验的患者、18名接受心脏介入手术的患者和10名冠脉造影术显示正常的病人, 结果显示激发实验阳性的病人血清中IMA的中位数明显高于基线水平。 而激发实验阴性的病人IMA与其基线水平相比较并不升高。经皮冠脉介入手术后的病人血清中IMA 亦较基线水平升高。而冠脉造影术后的病人IMA并不升高。
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