镉离子单克隆抗体的制备及其间接竞争酶联免疫分析方法的建立.pdfVIP

第28卷第4期 化 学 研 究 与 应 用 V01．28．No．4 2016年4月 ChemicalResearchandApplication Apr．，2016 文章编号：1004-1656(2016)04-0432-05 镉离子单克隆抗体 的制备及其间接竞争酶联免疫 分析方法的建立 周静清 ，冯 锋 ，邓安平 ，王玉珍 (1．山西大学化学化工学院，山西 太原 030006； 2．山西大同大学化学与环境工程学院，山西 大同 037009； 3．苏州大学材料与化学化工学部，江苏 苏州 215123) 摘要：制备镉离子单克 隆抗体，建立快速检测水样 中镉 离子 的间接竞争酶联免疫吸附分析方法 (Enzyme． LinkedImmunosorbentAssay，ELISA)。选择双功能螯合剂 1一(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-Ⅳ，Ⅳ，，v’，Ⅳ’．四乙酸 (ITCBE)，分别与载体蛋 白(牛血清 白蛋白，BSA；卵清蛋白，OVA)和镉离子连接，制备 出免疫原 (Cd—ITCBE． BSA)和包被抗原 (Cd—ITCBE—OVA)，采用免疫原免疫 BALB／C小鼠，利用细胞融合杂交瘤技术制备出针对镉 离子的单克隆抗体；建立快速检测水样中镉离子 的间接竞争 ELISA方法。结果：方法的 IC。为 13．67ng· mL～，检测限为0．48ngm·L～。该抗体除与汞离子的螯合物的交叉反应率为79．29％之外 ，与zn“、cr3、Pb 、 cu“ Ni 、Al 、Co“Fe“ Mg“ 、 、 、 、Ca和Ba均无交叉反应。超纯水、自来水和湖水样品中镉的加标回收率为 87．78％～103．3％，相对标准差为 1．60％～11．41％。建立的间接竞争酶联免疫吸附法灵敏 、快速，可用于水 样中镉离子的检测。 关键词：镉离子 ；单克隆抗体 ；酶联免疫吸附法(ELISA)；自来水 ；湖水 中图分类号：O661．1 文献标志码：A Preparation ofmonoclonalantibodiesand establishmentofindirect competitiveenzyme—linkedimmunosorbentassaymethod forCd ZHOUJing—qing，FENGFeng， ，DENGAn—ping ，WANGYu．zhen (1．CollegeofChemistryandChemicalEngineering，ShanxiUniversity，Taiyuan030006，China； 2．CollegeofChemicalandEnvironmentalEngineering，ShanxiDatongUniversity，Datong037009，China； 3．CollegeofChemistry，ChemicalEngineeringandMaterialsScience，SoochowUniversity，Suzhou215123，China) Abstract：Objective：Topreparemonoclonalantibody(mAb)againstcadmium ionanddevelopanindirectcompetitiveEnzyme． LinkedImmunosorbentAssay(ELISA)methodtorapidlydetectthecadmiumioninwatersamples．Methods：cadmiumionwasre． spectivelYcoupledtocarrierprotein(bovineserumalbumin，BSA；ovalbumin，OVA)viaaphenylisothiocyanate—EDTA(ITCBE)to formtheimmunogen(Cd-ITCBE—