流式细胞仪的操作和数据分析技术.ppt

什么是流式细胞仪 FACSCalibur每日开机程序 1、检查鞘液桶: 鞘液多少 管路畅通 2、检查废液桶: 空 管路畅通 3、先打开流式细胞仪 4、再打开电脑 5、气压阀置于加压位置 6、standby 5-10分钟 7、开始实验 利用Cellquest软件获取数据 利用Cellquest软件分析数据 FACSCalibur每日关机程序 1、10%漂白剂作样品，样品支撑架置于旁位，外管吸入1min 2、样品支撑架置于中位，HI RUN 内管吸入5min 3、样品换成蒸馏水重复1-2步 4、放置盛有1ml蒸馏水的试管于样品支撑架上 ５、退出所有程序，关闭电脑 ６、 standby 10分钟后关掉主机 7、 记录仪器使用 在Parameter description内建立存储文件夹 在Parameter description内建立存储文件夹 在Parameter description内建立存储文件夹 在Parameter description内建立存储文件夹 1.调电压，使目的细胞显示在图中 图1，FSC放大增益不足； 图2，FSC增益太高； 图3，SSC电压太低； 图4则理想 2.选定目的细胞，设门 3.调补偿：调去光谱重迭 我还等着用那！！！ 真好用 WinMDI 2.8 分析流式数据 Windows Multiple Document Interface For Flow Cytometry, Version 2.8 程序全称 下载网站 /software.html 适用范围 WinMDI 程序提供使用者双色或多色分析功能，除了可以制作一维直方图、二维点图、密度图、等高线图、及立体图谱外，还可作文字处理 All rights reserved by Dr Baiqing LI * Bengbu Medical College Department of Immunology ? by Dr Baiqing LI 免疫学教研室 * ●流式细胞仪实物 BD FACSaria BD-Calibur 流式细胞仪 工作站 开关 点击“苹果”图标 在下拉选项中寻找cell-quest软件 双击进入软件 Cellquest的软件界面 工具栏 操作步骤： 1.点击Acquire ，在下拉栏里选择connect to cytometer 工具板可用来画图、Region,Marker和文字等。点击选择工具板按钮 1.等高图：点击，可画等高图，可自定义图的大小。 2.选择：点击，可选择一个或多个目标，进行改大小或移动。 3.3维图：点击，可画3维图，可自定义图的大小。 4.直方图：点击，可画直方图，可自定义图的大小。 5.密度图：点击，可画密度图，可自定义图的大小。 6.散点图：点击，可画散点图，可自定义图的大小。 7.直方图marker：点击，可在直方图上定位Marker的左边界和右边界。 8.象限marker：点击，可在散点图、密度图和等高图上定位marker。 9.缩小：点击，然后点击图，将放大图缩小到原大小。 10.放大：点击，然后点击图，将缩小图放大到原大小。 11.矩形region：点击，然后在散点图、密度图和等高图中点击，然后拖动对角线至所需大小。 12.多边形region：点击，然后在散点图、密度图和等高图中点击形成起始点，然后拖动鼠标画出多边形顶点并在起始点处点击完成多边形region。 13.直方图region：点击，可在直方图上定位region的左边界和右边界。 14.椭圆形region:点击，然后在散点图、密度图和等高图中点击，然后拖动对角线至所需大小。 15.箭头：点击，然后在实验文件中点击，拖出直线。 16.文本：点击，然后点击定位插入点并编辑文字。 17.计算器：如果自动重复计算关闭，点击进行数据复计算 弹出此对话框说明机器与电脑建立链接 操作步骤： 1.点击Acquire ，在下拉栏里选择connect to cytometer 2.再次点击Acquire，在下拉栏里选择 parameter description 操作步骤： 1.点击Acquire ，在下拉栏里选择connect to cytometer 2.再次点击Acquire，在下拉栏里选择 parameter description 3.再次点击Acquire，在下拉栏里选择 counters 弹出此对话框 4.点击cytomter，在下拉栏内选择 Dector/amps 5.点击cytomter，在下拉栏内选择 Threshold 6.点击cytomter，在下拉栏内选择 stasus 7.