新型口腔修复纳米树脂生物安全性的初步评价.doc

口腔医学论文 新型口腔修复纳米树脂生物安全性的初步评价 ［摘要］　目的：通过黏膜刺激实验和溶血试验初步评价ｐｏｓｓ（ｐｏｌｙｈｅｄｒａｌ　ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ　ｓｉｌｓｅｓｑｕｉｏｘａｎｅ）复合树脂的生物安全性。方法：溶血试验：将Ｐｏｓｓ复合树脂加工成直径５ｍｍ，重量为５克的圆片３个分别装入３个装有１０ｍＬ生理盐水的试管中作为实验组，以生理盐水和蒸馏水分别作为阴、阳性对照组。将０．２ｍＬ稀释新鲜抗凝人血加入所有试管中，在离心机上离心５ｍｉｎ，分别吸取上清液，用分光光度仪在５４５ｎｍ波长处测定其光吸收度，计算Ｐｏｓｓ复合树脂的溶血率。黏膜刺激实验：按照国家关于口腔材料生物学试验方法，选择健康家兔１０只，将实验材料（Ｐｏｓｓ复合树脂）和阴性对照材料（医用牙胶）缝合于一侧颊黏膜上，另一侧为空白对照。２周后进行肉眼观察评价和组织学评价。 结果：溶血试验：ｐｏｓｓ复合树脂溶血率为０．４１％，低于５％，根据ＩＳＯ／ＴＲ７４０５－１９９７（Ｅ），ｐｏｓｓ复合树脂不会引起溶血。黏膜刺激试验：Ｐｏｓｓ复合树脂材料及阴性对照组均未出现局部及全身的不良反应，临床及病理反应等级属于无刺激。结论：ｐｏｓｓ复合树脂与稀释抗凝人血不会发生溶血且对试验动物颊黏膜无不良刺激反应。 ［关键词］　ｐｏｓｓ复合树脂　生物安全性　溶血试验　口腔黏膜刺激实验　　 光固化复合树脂是口腔科目前常用的充填材料和修复材料之一，牙科光固化复合树脂具有色泽美观，强度高，临床操作方便，粘结固位效果好等优点，在牙科修复领域引起了广泛关注［１，２］。近日，由哈尔滨工业大学航天学院与哈尔医科大学口腔医学院修复科共同研制开发的一种新型纳米材料，叫Ｐｏｓｓ复合树脂，是将ｐｏｓｓ以２％比例加入到传统光固化复合树脂中合成的。Ｐｏｓｓ复合树脂经初步验证具有很好的物理性能，化学性能和机械性能，在抗压伸、弯曲、剪切力方面比以往的纳米材料也有了明显的提高。鉴于其以上良好的性能，期望Ｐｏｓｓ复合树脂能应用于口腔临床。　　 与人体组织相接触的材料，要求对人体应无毒性，无刺激性，无致癌性和致畸变等作用。复合树脂是一种与人体组织长期接触的材料，对黏膜无刺激性，溶血率低于５％，有良好的生物安全性。ｐｏｓｓ复合树脂作为一种新型材料，在应用于临床之前，需进行生物学评价，根据不同的临床应用，选择不同的生物安全性评价［３］。而溶血试验和口腔黏膜刺激实验是评价口腔材料生物安全性的必须实验。 １　材料与方法 １．１　溶血试验 １．１．１　材料 １．１．１．１　实验材料 　Ｐｏｓｓ复合树脂（哈尔滨工业大学提供）；新鲜稀释抗凝人血。 实验仪器 　分光光度仪ＵＶ２６５；超声波清洗器；恒温浴箱；台式离心机；移液管１０ｍＬ；移液舱２００μＬ；分析天平。 实验试剂　 整个分析过程中，使用分析纯试剂及蒸馏水；生理盐水：０．９％ＮａＣｌ；新鲜抗凝人全血：每１０ｍＬ新鲜人全血中加人１ｍＬ　２０％（２０ｇ／Ｌ）草酸钾生理盐水液，于使用前配制，贮存于（４±２）℃下。 １．１．２　方法１．１．２．１　试件准备　将Ｐｏｓｓ复合树脂加工成直径５ｍｍ，重量为５ｇ的圆片３个，经生理盐水超声清洗１０ｍｉｎ，烘干备用。１．１．２．２　血的制备　抽取健康人血１０ｍＬ。在１０ｍＬ的新鲜抗凝全血中加入约１０ｍＬ的生理盐水。调整生理盐水的用量，使稀释后的抗凝血０．２ｍＬ在１０ｍＬ蒸馏水中于５４５ｎｍ处的吸光度值为０．８±０．３。将稀释抗凝血贮存于（４±２）℃中。１．１．２．３　实验步骤　将实验试件放入试管中，试管中加入１０ｍＬ生理盐水，取两个试管做对照组，阴性对照组：１０ｍＬ生理盐水。阳性对照组：１０ｍＬ蒸馏水。将所有试管置于３７℃恒温水浴箱中保持３０ｍｉｎ，在每个试管中加入稀释人血０．２ｍＬ缓慢混合，再放入３７℃恒温水浴箱中保持６０ｍｉｎ。所有试管经离心（４５００ｒ／ｍｉｎ，５ｍｉｎ）后，分别吸取各试管上清夜移入ＵＶ２６５型分光光度仪测量杯于５４５ｎｍ处测定其光吸收度，记录每组３只试管的均值。根据ＹＹ－Ｔ０２７９－１９９５中华人民共和国医药行业标准［４］，按下列公式计算血百分率：Ｚ溶血血百分率％＝（Ｏ·Ｄｔ试件一Ｏ·Ｄｎｅ阴性对照）／（Ｏ·Ｄｐｃ阳性对照一Ｏ·Ｄｎｅ阴性照）×１００％。 １．２　黏膜刺激实验１．２．１　材料１．２．１．１　实验材料　Ｐｏｓｓ复合树脂（哈尔滨工业大学提供）；口腔用牙胶（上海齿科材料厂生产）１．２．１．２　实验动物　健康家兔１０只（哈尔滨医科大学第一临床医学院动物实验中心提供），随机编号（１－１０），雌雄均可但雌性应无孕，体重２～３ｋｇ，双侧颊黏膜无病变。１．２．１．３　实验药品及辅助材料　２．５％戊巴比妥钠，０．２％新洁尔灭，１０％福尔马林，５－０医用无损伤缝合针线。以上均为哈尔滨医科大学口腔医学院提供。１．２．２　方法１．２．２．１　试