兽医临床诊疗技术第2章实验室检验.ppt

实验室检验就是运用物理学、化学和生物学等实验技术和方法，对病畜的血液、尿液、粪便、体液（如胃液、 脑脊髓液、 胸腹腔穿刺液）、组织细胞及病理产物，在实验室特定的设备和条件下，测定其物理性状，分析其化学成分，或借助于显微镜观察其有形成分的方法，以获取反映机体功能状态，病理变化或病因等客观资料，配合临床资料进行综合分析。 实验室检验是一种复杂而细致的工作，为了得到正确的结果，必须遵守严格的操作规程和次序。采取的样本必须有代表性，检验所用的试剂与器材，应符合要求，并定期进行检查和校正。要注意消毒工作，污染的器皿应先消毒后洗涤，以防传染性物质的扩散。 血液检验 尿液检验 粪便检验 瘤胃液的检验 穿刺液的检验 常见毒物的检验 第一节 血液检验 血液检验是临床医学检验中应用最广，对辅助诊断最有价值，最常用的基本内容之一。 血液是由血浆和血细胞两部分组成，是通过循环系统与全身各个组织器官密切联系，参与机体呼吸、运输、防御，调节生理，维持正常新陈代谢和内外环境平衡的。 临床血液学检查内容 物理学检查：借助物理学方法测定其物理特性，如凝血时间、红细胞脆性、红细胞沉降率、红细胞压积。 化学检验：即用定性或定量的化学分析方法，检测被检标本各种化学成分方面的变化，如血红蛋白的检查。 显微镜检查：检查其血细胞的形态及数量的变化，如红细胞，白细胞，血小板等。 一、血液的采集与血涂片的制作 猪的前腔静脉采血 马的颈静脉采血 兔的耳静脉采血 如分离血清，应将全血采集在试管中（不加抗凝剂），在室温下或25-37℃温水中斜置，血清析出后即可分离。血浆应在抗凝血采集后离心分离。血液采集后应尽快送检和检测。不能立即送检的血样，血片应固定，抗凝血、血浆和血清应冷藏。送检血样应编号，并避免剧烈振摇。血液学检查项目与血样保存的期限见下表 红细胞背景知识 红细胞也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，同时也是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介 。在所有的脊椎动物及若干无脊椎动物，其血红素包含在特定的细胞中来进行其机能活动，这种血球称为红细胞。其它的血细胞，如白血球，则是免疫细胞。 红细胞中含有血红蛋白，因而使血液呈红色。血红蛋白能和空气中的氧结合，因此红细胞能通过血红蛋白将吸入肺泡中的氧运送给组织，而组织中新陈代谢产生的二氧化碳也通过红细胞运到肺部并被排出体外。血红蛋白更易和一氧化碳相合，当空气中一氧化碳含量增高时，可引起一氧化碳中毒。 红细胞和血红蛋白的数量减少到一定程度时，称为贫血。红细胞大量被破坏可引起溶血性黄疸。 红细胞描述：多，小而圆，中央着色较浅，无核。禽类称为凝血细胞，一般为卵圆形，有细胞核，比哺乳动物的大得多，数量少 。 血液涂片的制备和细胞染色 １、涂片的制作 涂片时，血滴越大，角度越大，推片速度越快，则血膜越厚，反之则血膜越薄。 白细胞分类计数的血片宜稍厚，进行红细胞形态及血原虫检查的血片宜稍薄。 一张良好的血片，要求厚薄适宜，血液分布均匀，对光观察呈霓虹色，边缘整齐，能明显分出头，体，尾三部分，两侧留有空隙(以写明畜别，编号、日期)。 血膜分布不匀，主要是由于推片不齐，用力不匀，玻片不洁所致。 推好的血片可在空气中挥动，使其迅速干燥，以防细胞皱缩变形，并尽快固定染色。 原理 瑞氏染色法 姬姆萨氏染色法 瑞－姬氏复合染色法 （１）瑞氏染色法 （２）姬姆萨氏染色法 （３）瑞－姬氏复合染色法 磷酸盐缓冲液(PH6.4-6.8)：磷酸二氢钾0.3g加磷酸氢二钠0.2g再加蒸馏水至1000ml,配制成磷酸盐缓冲液调整pH,如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。 二、血液常规检验 红细胞沉降率的测定 红细胞压积容量测定 红细胞渗透脆性的测定 血液凝固时间测定 血红蛋白(Hb)含量测定 血细胞检验 血小板计数 定义:血液加入抗凝剂后，一定时间内红细胞向下沉降的毫米数，叫做红细胞沉降速度，简称血沉（ESP）。 定义:是指压紧的红细胞在全血中所占的百分率,是鉴别贫血的一项不可缺少的指标,简称比容。 1、压积升高 2、压积降低 定义:是指红细胞在低渗氯化钠溶液中的抵抗力，故又称为红细胞抵抗。 定义:是指血液自血管流出直到完全凝固所需的时间，用以测定血液的凝固能力。 在血红蛋白稀释管内加入0.1mol/L盐酸溶液至刻度10%处。 用血红蛋白吸管吸取血液至20mm3刻度处，，拭净管外附着血液，迅速将试管内血液缓缓吹入血红蛋白洗试管内的盐酸溶液中，再吸取上层盐酸溶液反复吹洗数次，勿使产生气泡。移去血红蛋白吸管，用小玻璃棒搅拌或轻轻摇振，使血液与盐酸溶液混合而呈褐色。 将测定管插入比色架内，静置10min。 慢慢分次沿测定管壁滴加蒸馏水，边加边混匀，边比色，直至血红蛋白测定管液体的颜色