雌激素对心肌梗死大鼠外周血干细胞与血管生成的影响.pdfVIP

雌激素对心肌梗死大鼠外周血干细胞及血管生成的 影响1 △ 金鑫，陈玉成 ，曾智，刘伟强，王斌，王浩宇 四川大学华西医院心内科，成都 （610041) E-mail ：chenyucheng2003@126.com 摘 要：目的 探讨雌激素对急性心肌梗死大鼠外周血干细胞和心肌血管生成的影响。方法 结扎去卵巢Sprague-Dauley(SD)大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死模型，给予不同剂量苯甲 酸雌二醇干预治疗，分别于急性心梗24h后免疫组化法检测归巢心肌的CD34+ 细胞数量，于1、 3、7d流式细胞术测定外周血CD34+ 细胞数，同时于心梗后1、3、7d免疫组化法测定心肌中 基质细胞衍生因子（SDF-1 ）的表达，分析心梗4W后心肌组织中微血管密度判断血管新生 情况。结果 与卵巢完整大鼠相比，去卵巢大鼠心梗后外周血和心肌组织中CD34+ 细胞数、 SDF-1的表达和4W后毛细血管密度显著降低，雌激素干预各组上述指标明显升高，其中， 雌激素替代组最高。结论 去卵巢大鼠心肌梗死前应用雌激素替代治疗，可增加心梗后骨髓 干细胞的动员和归巢, 促进心肌毛细血管生成，这一作用可能于雌激素促进心肌SDF-1表达 有关。 关键词：心肌血管生成，骨髓干细胞，动员，归巢，雌激素 大量的基础和临床实验均已证实，雌激素具有强大的心血管保护作用，如降低血清脂蛋 [1] [2] [3] 白 ，调节凝血纤溶系统 ，增加内皮一氧化氮和一氧化氮合酶的合成 ，提高组织的抗氧 [4] [5] 化能力 等。同时也有报道 ，雌激素对受损心肌细胞和血管内皮细胞具有强大的修复作用， 并促进心肌梗死后心功能的改善，间接调节导致心力衰竭和心室重构的内分泌因素如肾素－ 血管紧张素－醛固酮系统、心钠素、内皮素、前列腺素、基质金属蛋白酶等的表达，改善预 后。最近，Iwakura 等人[6,7]先后报道雌激素在动脉损伤后促进骨髓干细胞动员，使损伤血管 再内皮化。但是，对于心肌梗塞发生后，雌激素对于外周血干细胞是否也有动员作用以及其 机制目前尚无相应研究。我们推测，雌激素可能对骨髓干细胞的动员与归巢发挥作用并参与 了心梗后心肌血管生成，这样的作用可能同雌激素改善心梗的预后有关。本研究通过观察不 同雌激素水平下急性心肌梗死大鼠外周血CD34+细胞的动员和心肌归巢，探讨这一作用对心 梗后血管生成的意义，并进一步探讨这一作用机制，为进一步认识雌激素在心血管系统中的 药理作用提供一定的实验依据。 1. 材料和方法 1. 1 实验动物和材料 正常成年雌性Sprague-Dauley(SD)大鼠50只（四川大学华西动物实验中心），体重约 180±20g；兔抗大鼠CD34+多克隆抗体、兔抗大鼠SDF-1多克隆抗体、Ⅷ因子相关抗原抗体 和SABC试剂盒（武汉博士德公司）；流式细胞仪（美国Coulter公司，epics Elite ESP ）。 1. 2 实验方法 1.2.1 实验分组 取雌性大鼠 50 只，随机分为 5 组，每组各 10 只。急性心肌梗死组（acute myocardial infarction ，AMI ）；去卵巢后急性心肌梗死组（ovariectomized myocardial infarction，OMI ）： 1本课题受教育部博士点基金“心肌内注射雌激素血管生成效应及相关机制研究”（20040610057）资助 - 1 - 去卵巢后两周实施左冠状动脉结扎术；去卵巢后心梗＋雌激素治疗生理剂量组（estrogen physiological dose therapy ，EPT ）：去卵巢后两周实施左冠状动脉结扎术，给予苯甲酸雌二醇 注射液 0.1mg/kg 肌注，隔天一次；去卵巢后心梗＋雌激素治疗大剂量组（estrogen h