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专题80 基因工程的原理及技术【基础回顾】?　　?考点一、基因工程的概念?　　基因工程：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术，是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。?考点二、基因工程的操作工具?1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀”，又称为限制酶。?特点：能够识别DNA特定的核苷酸序列，切开两个核苷酸之间的磷酸二酯键。?限制酶切割DNA产生的末端有两种形式：黏性末端和平末端。?2．DNA连接酶——“分子缝合针”?作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。?3．基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”?　(1)常用载体：质粒。?　(2)质粒载体的特点：?　①能够在细胞内自我复制并稳定保存。?　②具有一个或多个限制酶切割位点，便于外源DNA片段插入其中。?　③具有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。?考点三、基因工程的基本操作程序?1．目的基因的获取：?　(1)从基因文库中获取；?　(2)利用PCR技术扩增目的基因；?　(3) 人工合成。?2．基因表达载体的构建(核心)?　(1)目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。?　（2）组成：目的基因、启动子（RNA聚合酶识别和结合部位，位于基因的首端）、终止子（终止信号，位