微生物的实验室培养2.ppt

注意： 移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处. 涂布平板操作： 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 P19讨论： 微生物的恒温培养：将接种后的培养基和一个未接种的培养基放在37℃的恒温箱中培养，培养12h和24h后，分别观察各培养皿中菌落的生长情况 微生物的恒温培养 平板画线法获得的菌落 稀释涂布平板法获得的菌落 稀释涂布平板法获得的菌落 结果分析与评价 1、未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明了什么？ （对照组）没有。若有菌落，说明灭菌不彻底。 2、在接种大肠杆菌的培养基上，你是否观察到了独立的菌落？这些菌落的颜色、形状和大小相似吗？ 是。相似。如在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。 3、培养12 h和24 h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因。 菌落的大小不同，菌落分布位置相同。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大。 4、如果你在培养基上观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？ 说明有杂菌污染。可能原因：灭菌不彻底、接种过程或培养过程中有杂菌污染。 菌种的保存 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2、长期保存：甘油冷冻管藏法 课题延伸 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌 单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 每种细菌在一定条件下所形成的菌 落，可以作为菌种鉴定的重要依据。 特征： 大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。 功能： 定义： 无鞭毛的球菌，常形成较小较厚边缘较整齐的菌落，有鞭毛细菌形成大而扁平、边缘波浪或锯齿状菌落 细菌的菌落 形态各异的菌落 课题1 微生物的实验室培养 基础知识 （一）培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质叫做培养基。 配制成液体状态的基质称为液体培养基。配制成的固体状态的基质称为固体培养基。 在液体培养基中加入凝固剂琼脂后，制成实验室最常用的琼脂固体培养基。 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。液体培养基主要用于工业生产。 （2）按功能分，可分为选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分分，可分为天然培养基和合成培养基。 1、培养基的类型： 2.培养基内所含的营养物质 (1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)无机盐 常见的选择培养基： 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离自生固氮微生物 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入纤维素的培养基: 分离能分解纤维素的微生物 加入含有某种除草剂培养基: 分离能降解某种除草剂的微生物 (1)碳源： 无机碳源: 、 、 有机碳源： 蛋白质 脂肪酸等 自养型微生物以无机碳为碳源， 异养型微生物以有机碳为碳源。 碳酸盐 碳酸氢盐 二氧化碳 糖类（主要） 凡是能为微生物生长繁殖提供所需碳元素的营养物质 碳源的分类: (2)氮源 氮源的分类: 无机氮源： 、 、 、 有机氮源： 蛋白胨 牛肉膏 尿素等 氮气 氨气 硝酸盐 氨盐 (1)pH值 如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性 (2)特殊营养物质 如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素 (3)氧气的含量 如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件 3.培养基内所需的其他条件 (二)无菌技术 1、获得纯净培养物的关键: 2、无菌技术包括的四大方面(参看教材15页) 3、消毒与灭菌 (1)消毒： 概念：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或