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组织学与胚胎学 Histology and Embryology 河北北方学院组胚教研室 张江兰 第一章 组织学绪论 一、组织学与胚胎学的研究内容 1 . 组织学(Histology)的定义 研究机体的微细结构及其相关功能的学科. 2 .组织学研究的内容 系统:功能相关的器官联合在一起 器官:由不同的组织构成 组织:由细胞和细胞外基质.四大类型:上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织 细胞:人体结构和功能的基本单位(1015 个、200 余种) 亚细胞和分子水平 3.胚胎学(embryology)定义:是研究个体发生及发育规律的科学,包括发生过程、发育机制、先天畸形等。 4.胚胎学的研究内容:人体在母体内的发育。历经266天。 二、和其他医学课程的关系 了解机体的结构,才可能透彻阐明其功能。因此,组织学的发展极大促进了生理学的进步。组织学也是病理学的基础,后者研究疾病状态中机体宏观与微观的结构变化, 与产科的关系 与临床的关系 另外,从哲学角度看,洞察人体自身的微观世界,其完美、巧妙、精细、丰富,令人叹为观止,能极大满足我们求知和视觉欣赏的欲望。 (一)常用显微镜 1.普通光学显微镜:最常用、最基本的观察工具。以普通光为光源,用染料染色增加颜色反差,显示细胞、组织的结构,即称光镜结构。 2.透射电子显微镜(TEM):1932 年卢斯卡、科诺尔发明,使分辨率提高到 0.2nm。利用超薄切片术(50~80nm), 两位电镜发明者于1986 年荣获诺贝尔奖。 以电子束为光源,利用组织、细胞的不同结构与重金属离子的结合量不同,显示细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构,即电镜结构或超微结构。 3.扫描电子显微镜(SEM):主要用于观察组织细胞的表面形貌,所得到的是明暗反差的三维立体图像。以电子束为光源的。 4.荧光显微镜: 5.激光共聚焦扫描显微镜 特殊染色: 硝酸银、醛复红、甲苯胺蓝(异染性)、荧光染料、 胎酚蓝活体注射火棉胶包埋、塑料包埋 (2) 冰冻切片 .(3)涂片、铺片、磨片 本章重点 组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念 组织学学习方法要点 石蜡切片术和超薄切片术的基本原理 HE染色法 四、组织学的学习方法 1、理论与实践相结合 2、形态和结构相统一 3、二维与三维相结合 4.局部与整体相结合 5.静态与动态相结合 * * 图2 心脏 (心肌细胞光镜图) 图3 心脏 上:肌丝结构电镜图 下:肌丝蛋白质构成 模式图 肌动蛋白 原肌球蛋白 肌钙蛋白 细肌丝 粗肌丝 肌球蛋白杆 肌球蛋白头 三、组织学与胚胎学常用的研究方法 (二)常用标本的制备技术 1、普通标本的制备技术 (1)石蜡切片术: 取材、固定、脱水、包埋、切片(5 ~ 10 μm 厚)、染色 苏木精- 伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, HE染色法):苏木精为碱性染料,使染色质和核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,使胞质和细胞外基质着红色 概念:嗜酸性、嗜碱性、中性 图6 腹腔注射台酚蓝,醛复红与偶氮焰红染色染色 图5 镀银染色,小脑皮质神经元 2、透射电镜标本的制备技术 步骤: ①及时取材固定②超薄切片(50-80 nm) ③用重金属电子染色(铅、铀等),形成黑白反差。 ④照片上电子密度的高低,被染成黑色的(深色)称 电子密度高, 染色浅的叫电子密度低。 扫描电镜标本的制备技术 标本经过固定、脱水干燥、表面喷镀金属膜即可观察。 4.组织化学与细胞化学技术 利用某些化学试剂与组织细胞样品中的某种物质发生化学反应,并呈现某种颜色,显微镜下可看到,间接反应某种组织细胞成分的存在. 可定性、定位、定量显示组织内糖类、脂类、蛋白质、核酸等物质. 糖类: PAS(过碘酸希夫)反应,显示多糖和糖蛋白,呈紫红色 糖 多醛 品 红 硫 酸 复 合 物 (希夫试剂,无色) 电镜细胞化学技术 过碘酸 紫红色反应产物 5.免疫组织化学或免疫细胞化学技术 以抗原-抗体结合反应为基础,在显微镜下显示组织或细胞内多肽、蛋白质等具有抗原性物质的技术. 电镜免疫细胞化学技术
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