微生物实验(实验三纯种分离)2015.pptVIP

微生物学实验 实验三（P68.72.78)  微生物菌落形态观察、纯种分离及接种技术 一、实验原理 纯培养：从一个细胞繁殖得到的微生物后代。 获得纯培养的方法： 稀释平板分离法 1 平板划线分离法 2 单胞挑取法 3 组织分离法 4 选择培养基分离 5 一、实验原理 稀释平板分离法： 将待分离样品做系列稀释，使样品中的微生物细胞充分分 散。取合适稀释度的样品与培养基混合，培养出现菌落。如稀 释度适合在培养基平板上即可出现的单个菌落。 平板划线分离法： 用无菌接种环挑取待分离材料，在平板培养基表面划线稀释 而获得单菌落的方法。 每人从实验二稀释平板测数法的培养基平板上选定一个孤立 的菌落，采用划线法分离、纯化出一个菌株。 2. 观察、比较、识别从土壤中分离的细菌、放线菌、霉菌 的 菌落特征。 3. 学习无菌操作（倒培养基平板、接种环灭菌、划线分离）的 基本方法。 二、实验内容 三、实验方法 用实验一配制的培养基 每人一个 火焰灼烧灭菌 挑菌，划线 挑菌量要少 镜检，菌体单一 无杂菌污染 STEP 1 STEP 2 STEP 3 STEP 4 倒培养基平板 接种环 灭菌 选取单 菌落 培养得到单菌落 无菌操作，在超净工作台酒精灯火焰旁操作 无菌基本操作——倒培养基平板 三、实验方法 用实验一配制的培养基 每人一个 火焰灼烧灭菌 挑菌，划线 挑菌量要少 镜检，菌体单一 无杂菌污染 STEP 1 STEP 2 STEP 3 STEP 4 倒培养基平板 接种环 灭菌 选取单 菌落 培养得到单菌落 无菌基本操作——接种环灼烧灭菌 接种和分离工具 1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 接种环灼烧灭菌 三、实验方法 用实验一配制的培养基 每人一个 火焰灼烧灭菌 挑菌，划线 挑菌量要少 镜检，菌体单一 无杂菌污染 STEP 1 STEP 2 STEP 3 STEP 4 倒培养基平板 接种环 灭菌 选取单 菌落 培养得到单菌落 无菌基本操作——划线分离 平板划线分离方法 1.分区划线法 2.连续划线法 3.方格法 4.放射法 5.四格法 1. 严格按照无菌操作要求进行操作 ；2、划线时接种环与平板之间保持较小角度（＜30℃）；3、划线时用力小，不能将培养基划破；4、挑菌量不宜太多。 菌落特征观察 菌落：在固体培养基上（内），一个或几个同种微生物细胞局 限在一处大量繁殖，形成的肉眼可见的，有一定形态特征的细胞 群体。是细菌鉴定的重要指标。 菌落特征观察：形态、大小、色泽、透明度、致密度、边缘 菌落形状 菌落高度 菌落边缘 点状 圆形 丝状 不规则状 假根状 扁平 圆形 隆起 凸透镜状 垫状 脐突状 完整 波状 裂片装 锯齿状 丝状 卷曲状 四大类微生物菌落基本特征  四、实验作业 《微生物实验报告册》P3：1；P4：1；P5：1.2