分子伴侣协助重组蛋白质高效表达.pdfVIP

《生命的化学》2012 年32 卷6 期 · 556 · ● Research Progress CHEMISTRY OF LIFE 2012，32(6) 文章编号: 1000-1336(2012)06-0556-06 分子伴侣协助重组蛋白质高效表达 1,2 1,2 1,2 1,2 沈何放 卢慧甍 曹慧玲 尹大川 1西北工业大学生命学院特殊环境生物物理研究所，西安710072 2西北工业大学空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室，西安710072 摘要：一直以来，具有生物活性的高纯度可溶重组蛋白是蛋白质结构和功能研究的基础，是研究者所期待的目标。但是，在常 规表达中异源性重组蛋白往往不能正确折叠为具有生物活性的构象，以致于难以高效表达。本文综述了分子伴侣协助重组蛋白 表达的分子机理及其应用现状和所存在的问题，其中涉及分子伴侣的选择原则、蛋白质表达系统与分子伴侣的相关性及相关的 改良策略，希望能为合理利用分子伴侣参与重组蛋白表达研究提供借鉴。 关键词：分子伴侣；HSP60；HSP70；重组蛋白质表达 中图分类号：Q78 蛋白质结构研究所必需的高质量活性蛋白质晶 特定功能的一类蛋白质，该定义是针对帮助 “含多 体需要大量高度纯化的活性蛋白质，而这需要高活 肽的结构在体内进行非共价的组装”提出的，其功 性、高产量的蛋白质表达系统。对于常规的原核表 能对于其本身结构并没有严格的界定。按照此定 达系统来说，目标蛋白质不能正确折叠导致出现包 义，分子伴侣并不是某单一类型的分子，而是具有 涵体、可溶性表达量低、活性低等一系列问题。对 此功能的蛋白质都可以称之为分子伴侣，分子伴侣 于真核表达系统来说，也常常存在可溶性表达量低 是功能性定义。 和活性低的问题。最大的原因是辅助折叠的分子伴 1.2 分子伴侣的种类 侣的量偏低，而分子伴侣的应用则为类似问题提供 分子伴侣分为三类：普通意义上的分子伴侣即 了解决之道。本文对分子伴侣帮助提高重组蛋白质 热激蛋白、具有酶活力的分子伴侣(又称折叠酶) 、分 有效表达进行初步总结和讨论。 子内伴侣(具有与分子伴侣类似功能的前导肽) 。分子 1. 分子伴侣简介 伴侣在本文中专指热激蛋白(heat shock protein, HSP)。 1.1 分子伴侣的概念 分子伴侣根据其分子量分为若干家族：HSP40 、 分子伴侣被定义为由互不相关的蛋白质家族的 HSP60 、HSP70 、HSP90 、HSP100 及小HSP[2]，其中 成员组成的一类蛋白质，其功能是帮助含多肽结构 参与协助重组蛋白表达研究最多的是其中的两类： 的分子在体内进行正确的非共价组装，但并不是这 HSP60和HSP70。 些分子在完成组装后发挥正常生物学功能的组成部 2. 分子伴侣协助重组蛋白质表达的分子机理 分[1] 。由分子伴侣的定义可以看出，分子伴侣是具有 分子伴侣识别的折叠过程中形成的非天然构象 并非特定多肽序列，种间特异性不强。非同源分子 收稿日期：2012-02-15 伴侣与重组蛋白质可相互作用，分子伴侣协助目标