醋酸薄膜电泳.pptVIP

实验目的 1、掌握电泳法分离蛋白质的原理 2、熟悉醋酸纤维素薄膜电泳的操作、注意事项 3、熟悉测定血清中各种蛋白质相对百分含量 的方法 4、了解A\G的临床意义 电泳 依据分子或颗粒所带电荷、形状、大小等不同，因而在电场介质中移动速度不同，从而达到分离的技术。 二、电泳的影响因素 分离样品的性质 电泳介质的pH 缓冲液的离子强度 电场强度 电渗作用 电渗作用 在电场中液体对固体支持物的相对移动. 三、电泳的分类 醋酸纤维素较纸电泳的优点 电渗作用影响小 醋酸纤维素膜对蛋白的吸附小，几乎无“拖尾”。 由于醋酸纤维素亲水性小，所容纳的缓冲液也较少，电流大部分是由样品传导，所以分离速度快。 血清蛋白质 清蛋白和球蛋白 血清蛋白电泳的正常组分 醋酸纤维膜电泳蛋白组分变化的临床意义（A/G） 实验结果 注意事项 1.点样面为不光滑面，勿用手触摸感知； 2.点样量适中，垂直点样； 3.点样端接电泳仪负极； 4.膜条与滤纸需贴紧，拉直； 5.谨防触电。 1、电泳时，点样端置于电场的正极还是负极？为什么？ 2、电泳后，泳动在最前面的是何种蛋白质？各谱带为何种成分？请分析原因。 3、电泳图谱清晰的关键是什么？如何正确操作？ 待分离