渗透胁迫下小麦根质膜Ca2+_ATP.PDF

维普资讯 墨f一 5_ 第11215至堂 旦箩3期 坐 西北农业大学学报 Vo1．25N．o．3 塑 !：生!!： ：塑 !堂竺 ! 』 ： !! 渗透胁迫下小麦根质膜Ca2+_ATP。。 活性及动力学 曹翠玲 (1西北农业大学实验 中心，2基础科学蔫，陕西拓凄 712100) 摘 要 在渗透势为一0．5和一1．0MPa的PEG溶液胁迫下，小麦抗旱品种陕台 6号 根质膜 (PM)Ca -ATPⅢ活性分别增加59 和25 ，水分敏感品种郑引1号该酶活性是先 略降5 而后增加4a 。8mmol几 EGTA髓明显抑制PMCa -ATP．活性 ，陕合6号抻制率 为 43 ～77 ，郑引1号为46 ～56 ，其中两品种在PEG胁迫以后 ．EGTA的抑制率减 小．经对Ca -ATPo的动力学分析表明t随着胁迫强度的增加，陕音6号 』l(皿值分别下降 46 和 22 ， 虽略有增加，但变化不大。郑弓f1号置。值分别下降75 和82，i，一 约降 低到对照的1／3． 关键词 堡重 ，质膜ca一ATP一，苎 墨 酗 {毛 中图分类号 Q945．12，Q946．5，$512．1ol 自从利用蔗糖梯度离心分离技术证明原生质膜制剂存在ATP。活性后，关于质膜 (PM)ATP 的研究一直受到』们的重视 。目前对于质膜上研究比较清楚的是以100 kD催化亚基二聚体形式存在的H ATP 。和以140kD多肽存在的Ca~-ATP． 。但 因所用材料的不同，也有 100和 120kD不等的Ca 一ATP。报道 “。存在于质膜和内质 网膜上的Ca+-ATP (钙泵)是 ca 的主动转运系统之一 【，其 以水解ATP提供能源 将 ca 泵出胞液，在维持细胞钙稳态和钙信使系统中起着重要的作用。Ca ．ATP 受 Ca 、CaM 等多种因子调节 。有关外界环境的改变，尤其在渗透胁迫下Ca ．ATP 活性变化的报道所见甚少，本研究以小麦根为材料，对渗透胁迫下PMCa ．ATP 活性及 其动力学变化和钙螯台剂EGTA的抑制作用进行了探讨。旨在为逆境条件下植物细胞中 的钙泵及钙调节作用研究提供理论依据 。 1 材料与方法 1．1 材料及处理 选用冬小麦 (triticumaestiz,umL．)抗旱品种陕台6号和水分敏感品种郑引 1号。种 子用 2g／LngCl：消毒 10min，自来水冲洗数次，吸水培养约2Oh，待露 白后播于尼龙网 上，25±1℃温箱中萌发培养 5d，用渗透势为一O．5和一1．0MPa的PEG溶液处理根系 24h，进行下列项 目测定 收稿 日期 1996-o5—23-修改稿收到 日期 1996—12-03 谭厝来源 雷家 自鼎科学基金贷助项 目 作者筒舟 日叠印，男，1960年生，高级实验师，硬士 维普资讯 西北农业大学学报 第 25卷 1．2 测定项目爰方法 质膜分离与纯化方法同文献El0]f质膜 Ca 一ATP．活性测定参照文献[11，12]的方 _ 法，略加改进：取 0．5mL反应介质含Tris—HC1(pH7．5)200mmo]／L，NaCI50mmol／L， E薯 ．．目一。暑n／鹏，．I ．+l0 蓦 EDTA—Na：0．005mmol／L，，DTT 10mmol／L，CaCI：4mmol／L，ATP5mmo