dna分子标记原理及技术.pptVIP

分子标记技术可用于： 鱼类作为实验动物，比哺乳动物等具有更多的优点： 1、产卵量大 2、体外受精 3、体外孵化 ?聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)简称ＰＣＲ，是一项在短时间内大量扩增特定的ＤＮＡ片段的分子生物学技术。 PCR（聚合酶链反应）——快速取得大量DNA片段的方法 原料：样品DNA、引物（RNA）、DNA聚合酶、 脱氧核苷酸（dATP，dCTP，dGTP，dTTP） 步骤：①变性 94-95℃ DNA双链解旋 ②退火 55℃ 与引物结合 ③复制 72℃ 应用：①生物进化和古人类学研究 ②法医学 RAPD RFLP 实验流程 DNA提取 限制性内切酶消化 电泳分离 放射自显影检测 RFLP 显性标记 or 共显性标记 PCR-RFLP 随机扩增多态性DNA（RAPD） RAPD是以基因组DNA为模板，以一个随机的寡核苷酸序列作引物通过PCR扩增反应，产生不连续DNA产物，用以检测DNA序列的多态性。 该方法的优点主要是: 简单易行、需要的DNA量极少（15-25ng）、无放射性、实验设备简单、周期短，因此受到研究者的普遍欢迎。 目前该方法已广泛用于种质资源鉴定与分类、目标基因的标记等研究上，也有人利用RAPD标