2紫外-可见分光.ppt

2.3 紫外-可见分光光度计 光源 单色器 吸收池 检测器 信号指示系统 紫外-可见分光光度计的类型 单光束分光光度计 双光束分光光度计 双波长分光光度计 单光束分光光度计 经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行吸光度的测定 国产722型；751型；724型；Backman DU-8型 单波长双光束分光光度计 双波长分光光度计 分光光度计的校正 镨钕玻璃或钬玻璃都有若干特征的吸收峰可用来校正分光光度计的波长标尺，前者用于可见光区，后者则对紫外和可见光区都适用。 可用K2CrO4标准溶液来校正吸光度标度。 2.4 分析条件的选择 仪器测量条件 选择适宜的吸光度范围，以使测量结果的误差尽量减小 选择最大吸收波长为入射波长 狭缝宽度为试样吸收峰半宽度的十分之一 A=-lgT= εlc 微分后得 d lgT=0.4343dT/T=- εldc 或 0.4343ΔT/T=- εlΔc 代入Lambert-Beer定律，则测定结果的相对误差为 Δc/c= 0.4343ΔT/(T lgT) 当吸光度A=0.434时，T＝36.8％时吸光度测量误差最小 反应条件的选择（显色反应） 反应的生成物必须在紫外、可见光区有较强的吸光能力，反应有较高的选择性 反应生成物应当组成恒定、稳定性好，显色条件易于控制 对照性要好，显色剂与有色配合物的?max的差别要在60nm以上 溶液酸度的影响 显色反应的时间、温度、放置时间对配合物稳定性的影响 溶剂参比 试剂参比 试样参比 平行操作溶液参比 干扰物质本身有颜色或与显色剂形成有色化合物，在测定条件下也有吸收； 在显色条件下，干扰物质水解，析出沉淀使溶液浑浊，致使吸光度的测定无法进行；与待测离子或显色剂形成更稳定的配合物，使显色反应不能进行完全。 控制酸度 选择适当的掩蔽剂 利用生成惰性配合物 选择适当的测量波长 预分离 多组分同时测定；导数光谱法；双波长法 2.5 紫外-可见分光光度法的应用 定性分析 比较吸收光谱曲线和用经验规则计算最大吸收波长λmax，然后与实测值进行比较 分子或离子对紫外光的吸收只是他们含有的生色基团和助色基团的特征，而不是整个分子或离子的特征。因此需要参照Woodward-Fieser规则和Scott规则 判别顺反异构体（反式＞顺式） 判别互变异构体（共轭＞非共轭） 定量分析 单组分定量方法 多组分定量方法 双波长法 示差分光光度法 导数光谱法 单组分定量方法 标准曲线法 标准对比法 多组分定量方法 双波长法 示差分光光度法 Ax ＝ ? l cx As ＝ ? l cs A = ?A ＝ Ax －As ＝ ? l (cx-cs) ＝ ? l ?C 　 导数光谱法 配合物组成及稳定常数的测定 摩尔比法 等摩尔连续变化法 * 反应条件的选择 参比溶液的选择 　干扰及消除方法 　消除干扰的方法 结构分析 *