惊厥持续状态幼年大鼠海马中葡萄糖调节蛋白78及半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12的表达及依达拉奉对其影响.pdfVIP

生垡』L魁盘!蓝；Q!!笙!』j笙!!登笙!期g!i!』￡型也!：』!!!!型!Q!!：!!!：塑，盟!：! ·53· ．论著 惊厥持续状态幼年大鼠海马中葡萄糖 调节蛋白78与半胱氨酸门冬氨酸 特异性蛋白酶12的表达及 依达拉奉对其影响 李光乾王海萍蒋春明 【摘要】 目的观察幼年大鼠惊厥持续状态(statusconvulsion，SC)后脑组织海马中内质网分子 伴侣葡钧糖调爷蛋白78(glucoseregulatedprotein，GRP78)、半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12 (Caspase．12)的表达及神经细胞凋亡的变化，并探讨依达拉奉(edaravone，ED)对三者的影响。方法 将195只SD幼年雄性大鼠随机分为乍理盐水对照组(NS组)、惊厥持续状态组(SC组)和依达拉奉 预处理组(ED组)，每组65只，各组均按sc后处死时间点分为4、12、24、48、72h五个亚组，每组13 只。采用氯化锂一匹鲁忙品化学点燃法制备幼年大鼠sc模型。应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR) 法检测GRP78 mRNA和Caspase．12mRNA的表达，免疫组化法检测大鼠海马中GRP78和Caspase一12 蛋白表达情况，TUNEL法枪测神经细胞凋亡数的变化。结果(1)免疫组化结果显示sC组幼年大鼠 海马中GRP78(12h组0．1480±0．0164，24h组0．1682±0．0114，48h组0．1540±0．0102)和Caspase- 12(12h组0．1325±0．0165，24h组0．17944-0．0213，48h组0．15254-0．0423。72h组0．1309± 0．0199)表达增强．与NS组(GRP78：12h组0．12144-0．0147，24h组0．12724-0．0177，48h组0．1260 h h组0．1050±0．012l，24h组0．1041±0．015l，48h组0．10584-0．0222，72 4-0．0157；Caspase-12：12 h 组0．10364-0．0186)比较差异有统计学意义(P0．01或0．05)；与SC组比较。ED组GRP78(12 h组0．1721 组0．15504-0．0131，24h组0．18864-0．0154，48 4-0．0151)表达明显增强，而Caspase-12 (12h组0．121l4-0．0184，24h组0．15454-0．0205，72h组0．10854-0．0219)表达明显降低，差异均有 mRNA 统计学意义(P0．01或P0．05)；(2)RT-PCR法检测结果显示GRP78mRNA和Caspase-12 表达趋势与蛋白基本相似；(3)sc组在惊厥12h(11．414-2．37)时间点海马CA。区TUNEL阳性细胞 数已硅著高于NS组(P0．01)，48h(28．784-5．11)达峰，而ED组TUNEL阳性细胞数在12～72h时 h组13．094-2．54，48 间点(12h组8．98±2．22，24 h组20．57±4．89)均较sc组硅著下降(P0．Ol h组6．22 或P0．05)，但仍高于NS组(124-1．50，24h组6．57±1．6l，48h组6．72±1．14)(P0．01 或P0．05)，在4h时l’甘J点三组(NS组6．29±I．49．sC组6．614-I．71，ED组5．75±1．41)间TUNEL 阳性细胞数蔗异无统计学意义(P0．05)。结论sc后大鼠海屿GRP78和Caspase·12的表达增强． ED町卜调旺鲁忙品致瘌大鼠海马GRP78和下调Caspase-12的表达，并使神经细胞凋亡数减少；提示 ED对SC引起的呐损伤叮能有保护作用。 【关键词】 发作；热休克蛋FI质类；半胱氨酸天冬氨酸蛋门酶12；细胞凋