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维普资讯 第 19卷 2期 中 国 病 毒 学 19 (2)： l】4— 119 2004年 4月 VIR0L0GICA SINICA April 2004 全基因组 SHIV—KB9克隆的构建及其在人、猴 外周血单核细胞中的复制 吴颖运 ，洪坤学 ，陈 佩 ，陈启明 ，耿运 邵一鸣 ” (1．南开大学生命科学院，天津 300071： 2 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心，北京 100050) 摘要：将分别携带SHIV—KB9(SIV／HIV一1KB9)基 组的3 端和 5 端的两个半长克隆，体外连接成 SHIV—KB9 全基因组克隆。含有全长基 的质粒培养时易发生同源重组和缺失，采用 JM109作为宿主菌以及 30~C、低转速 的培养条件，可保持质粒的稳定性。通过PCR，RT—PCR和猴免疫缺陷病毒(SIV)gagp27核心抗原滴度检测表明： 感染性克隆SHIV—KB9可有效 人、恒河猴及食蟹猴的外周血单核细胞中复制。 关键词：SHIV—KB9：全基因组：感染；PBMC 中图分类号：Q78 文章标识码：A 文章编号：1003—5152(2004)02—0l】4—06 GenerationofFull-genomeSHIV-KB9CloneandItsReplicationinHuman andM onkeyPeripheralBloodMononuclearCells WU Ying—yun，，HONG Kun．xue! ， CHENPei，CHENQi．ming，GENGYun—qi，SHAOYi—ming， (．CollegeofLifeSciences，NankaiUniversiO,Tianjin300071，China；2．NationalCenterforA1DS／STDControland Prevention，Beijing100050，China) Abstract：SHIV．KB9 chimericviruswasconsturctedby two consturctsrepresenting the3’and 5’ fragmentsoftheviralgenome．111isfull—genomeSHIV—KB9．withlargesizeandlongterminalrepeat sequence(LTR)．couldbemaintainedstableinEcolJM109straininthecultivationconditionof30℃ and 180r／min．The infectivityofthefu11．1ength SHIV．KB9 inhumanperipheralbloodmononuclera cells(PBMC)，cynomolgusandrhesusmonkeyPBMCwaschraacterizedbypolymerasechainreaction (PCR)，reversetranscriptionPCR (I 一PCR)andSimianimmunodeficiencyviurs(SIV)p27gagantigen titrationassay． Keywords：SHIV．KB9；Ful1．genome；Infection；PBMC infectionraevulnerabletoinfe