雷公藤RNA提取方法选择与优化.pdfVIP

西北林学院学报2014，29(2)：112～116 ofNorthwest Journal ForestryUniversity doi：10．3969／j．issn．1001—7461．2014．02．20 雷公藤RNA提取方法选择与优化 陈 欣1，祝传书1’2，冯俊涛1’弘，张兴h2 (1．西北农林科技大学无公害农药研究服务中心，陕西杨陵712100；2陕西省生物农药工程技术研究中心，陕西杨陵712100) 摘 要：建立提取完整性好、丰度高的雷公藤RNA的方法，是后续分子生物学试验的必要前提。试验 以雷公藤叶、根、愈伤组织和悬浮细胞为材料，比较亚精胺法、SDS法、CTAB法和异硫氰酸胍法从雷 公藤组织中提取的RNA，并对最佳方法进行优化。结果表明：SDS法从雷公藤组织中获得RNA片段 完整性较好，但丰度较低；对该方法的操作步骤进行删减，并在2次氯仿／异戊醇去除蛋白质和多糖的 过程中进行不同时间和程度的振荡提取，得到的RNA较优化前丰度更高，完整性更好，28SrRNA条 带的亮度约为18SrRNA条带亮度的2倍，经过紫外分光光度计测定A2。。／A。。。比值在1．8～2．o之 间，A2。。／A2。。比值在