十一微生物学新技术在环境领域中的应用.pptVIP

第十章 微生物学新技术在环境领域中的应用; 固定化微生物，用制备固定化酶的方法将微生物固定在载体上，即成固定化微生物。 固定化细胞比游离细胞稳定性高，催化效率比离体酶高，且比固定化酶操作简便，能完成多步酶反应。; 二、酶的分离提纯 利用微生物生产酶制品可以分为菌种选育、发酵培养、分离提取和酶制品保存四个步骤。 1纯化： ●盐析法，绝大多数情况采用（NH4）2SO4。 ●有机溶剂沉淀法， 乙醇或丙酮 ●层析法，吸附层析法、离子交换层析法、分子筛过滤层析法、等电点沉淀法 ; 三、固定化方法 固定化方法有载体结合法、交联法、包埋法和逆胶束酶反应系统。 ; ; 1、载体结合法 将酶固定在非水溶性载体上。载体有葡聚糖、活性碳、胶原、琼脂糖、多孔玻璃珠、高岭土、硅胶、氧化铝、羧甲基纤维素等。 2、交联法 利用双功能???剂或多功能试剂使酶与酶发生交联而进行固定。交联剂有：戊二醛、双重氮联苯胺和六甲撑二异氰酸酯。; 3、包埋法 将酶包埋在凝胶格子（格子型）中，或由半透性的聚合物膜组成的胶囊内（微胶囊型）的方法。 格子型的包埋材料：聚丙烯酰胺（PACAM）凝胶、聚乙烯醇（PVA）、琼脂、硅胶等。 微胶囊型的包埋材料：尼龙、乙基纤维素和硝酸纤维素 ; 4、逆胶束酶反应系统 表面活性剂的两性分子在有机溶剂中自发形成聚集体，其亲水一端连接成逆胶束的极性核，水分子插于核中，其疏水性的一端进入主体有机溶剂中，酶分子溶于逆胶束中，组成逆胶束酶系统。 对微生物细胞的固定化最适合用凝胶包埋法。;四、固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 英国采用固定化细胞反应设备处理含氰废水。 中国应用固定化细胞技术降解含直链烷基苯磺酸钠（LAS）废水，去除率和酶活性保存率均在90%以上。 德国将9种降解对硫磷农药的酶共价固定在多孔玻璃珠、硅胶珠上，制成酶柱处理对硫磷废水，获得95%以上的去除效果。 ; 第二节 微生物絮凝剂; ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; 2、微生物絮凝剂的化学本质 微生物所产生的絮凝剂主要是微生物代 谢过程中所产生的多聚糖类，有些是蛋白质（或多肽），或者是含有蛋白质（或多肽）。 ;三、微生物絮凝剂的絮凝机理 “桥联作用”机理：絮凝剂大分子借助离子键、氢键和范德华力，同时吸附多个胶体颗粒，在颗粒之间产生“架桥”，从而形成一种网状的三维结构而沉淀下来。 絮凝剂的分子结构、形状、相对分子质量和所带基团会影响其絮凝效果。; 四、微生物絮凝剂的合成和应用 1、微生物絮凝剂的合成 一般认为，微生物多在其生长的中后期释放絮凝剂形成絮体，但到了静止期后期，细胞不再产生新的絮凝物质，甚至会由于出现解絮凝酶而导致絮凝活性下降。 培养基的组成、初始pH、培养温度、通气状况等会影响絮凝剂的合成。 提取方法：凝胶色谱，有机溶剂提取和碱提取。;2、微生物絮凝剂的应用 (1)高浓度有机水废水的处理 NOC-1生物絮凝剂加Ca2+处理畜业生产产生的废水； C-62菌株产生的絮凝剂处理？革废水。 （2）染料废水的脱色 用于造纸黑液、糖蜜废水、墨水废水的脱色。 ; (3)乳化液油水分离 用广泛产碱菌（Alcaligenens latus ）培养物易将棕榈酸从其乳化液中分离出来。 （4）活性污泥的处理 从红平红球菌 （Rhodococcus erythropolis ）分离得到的絮凝剂可促进污泥的沉降。 ; 第三节 分子生物技术在环境领域中的应用; 2、PCR技术 PCR(Polymerase chain reaction)称为DNA多聚酶链式反应，是对特异性DNA片段在体外进行扩增的一种非常快速而简便的方法。 （1）PCR的原理： ;; （2） PCR技术的操作方法： ①加热变性 将待扩增的DNA置于94~95℃的高温中加热5min，使双链DNA解链为单链DNA，分开的两条单链DNA作为扩增的模板。 ②退火 将加热变性的单链DNA溶液的温度缓慢下降至55 ℃后，在这过程中引物的DNA的碱基将与单链模板DNA一端碱基配对。 ; ③延伸 退火之