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细胞工程简介 一、细胞工程概念 应用细胞生物学和 的原理和方法，通过某种工程学手段，在 整体水平或 水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的 或获得 产品的一门综合科学技术。 分子生物学 细胞 细胞器 遗传物质 细胞 二、细胞工程分类 分为 工程和 工程。 植物细胞 动物细胞 植物细胞工程常用技术手段 和 等，其理论基础是 。 动物细胞工程常采用技术手段 、 、 、 和 。其中 是基础。 植物组织培养 植物体细胞杂交 细胞的全能性 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 胚胎移植 核移植 动物细胞培养 三、比较 （一）植物组织培养与动物细胞培养 1、过程 （1）植物组织培养 再分化 激素、需光 脱分化 激素、不需光 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽 胚状体 植物体 ↘ ↗ 回答：脱分化?再分化？愈伤组织？光？激素？ （2）动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 剪碎 胰蛋白酶 细胞悬浮液 10代细胞 40~50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 回答：原代培养、传代培养？细胞株、细胞系？ 2、原理 （1）植物组织培养 （2）动物细胞培养 细胞全能性 细胞增殖 3、培养基（性质/特有成分） （1）植物组织培养 （2）动物细胞培养 固体/蔗糖、植物激素 液体/葡萄糖、动物血清 成分：矿质元素、维生素、蔗糖、植物激素和有机添加剂 成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。 4、取材 （1）植物组织培养 （2）动物细胞培养 较幼嫩部位（无性生殖）/花药（有性生殖） 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 分裂增生能力强 5、培养结果 （1）植物组织培养 （2）动物细胞培养 植物体（试管苗）/愈伤组织/胚状体 细胞株/细胞系 6、应用 （1）植物组织培养 （2）动物细胞培养 ①快速繁殖、培育无病毒植株（根尖、茎尖部位的细胞）②利用愈伤组织生产药物、食品添加剂、香料、色素、杀虫剂等③制造人工种子，解决有些植物结子困难、发芽率低、繁殖困难等问题 ④培养转基因植物 此外还有单倍体育种过程中花药离体培养过程 ①生产蛋白质生物制品②培养皮肤细胞，为烧伤病人植皮③检测有毒物质（根据变异（染色体结构和数目变异）细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性）④用于科学研究（生理、病理、药理），为治疗、预防疾病提供理论依据 7、相同点： 适宜的外界条件（温度、pH、无菌等），营养物质、激素、离体等 三、比较 （二）植物体细胞杂交和动物细胞融合 1、过程 （1）植物体细胞杂交 （2）动物细胞融合 原生质体融合 植物组织培养 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 酶解去壁 促融 脱分化 再分化 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B AB 形成细胞壁 细胞A 细胞B 促融 AA、BB、AB 筛选 AB 2、融合方法 （1）植物体细胞杂交 （2）动物细胞融合 ①融合前操作： ②诱导融合： 酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶） 物理方法：离心、振动、电刺激 化学方法：诱导剂PEG ①融合前操作： ②诱导融合： 胰蛋白酶处理获得单个细胞 物理方法：离心、振动、电刺激 化学方法：诱导剂PEG 生物方法：灭活病毒做诱导剂 3、原理 （1）植物体细胞杂交 （2）动物细胞融合 细胞膜的流动性、细胞全能性 细胞膜的流动性 4、结果 （1）植物体细胞杂交 （2）动物细胞融合 经原生质体融合获得杂种细胞，组培后获得杂种植株 获得杂种细胞 5、应用 （1）植物体细胞杂交 （2）动物细胞融合 育种（克服远缘杂交不亲和的障碍,扩大了可用于杂交的亲本组合范围） 制备单克隆抗体 2、特点： 强， 高。 特异性 灵敏度 四、单克隆抗体 3、制备过程 1、概念： 单个B淋巴细胞通过无性繁殖产生化学性质单一，特异性强的抗体。 （理解：这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子） 抗原 小鼠 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 融合 筛选 杂交瘤细胞 培养 筛选 产生特定抗体的细胞群 扩大培养 体外培养 体内培养 提取 单克隆抗体 培养液中提取 腹水中提取 （1）基础研究（2）诊断、治疗、预防疾病。例如：单抗诊断盒、“生物导弹”治疗癌症 4、应用 五、胚胎移植、核移植、胚胎分割移植 体外受精 早期胚胎 培养 移植 新个体 发育 1、试管牛和试管婴儿 （1）简要过程 （2）生殖方式 有性生殖 （3）应用的技术手段 动物细胞培养、胚胎移植 （4）意义： 试管牛：优良种牛的繁殖；试管婴儿