0121如何撰写国家自然科学基金申请书.pptVIP

如何撰写国家自然科学基金申请书 黎 明 涛 中山大学蛋白质组学中心 中山大学中山医学院 基金申请 选题 撰写申请书 答辩 写好申请书是申请成功的关键 基金的评审实质上只是对基金申请书质量的评审 评审实际上只评申请书本身，不评实际学术水平 学术水平高不等于申请能批准 基金评审相对公正 撰写前的准备 好心情、好身体 想好再写 3h /天 读指南、读通知 注意截止期 熟知申请过程、有关规定 读标书、读高手、读同行、读自己 选题 卖点：创新性 工作基础 沟通 科研科、医科处 标 题 一个好的标题等于成功一半要求 确切、醒目、新颖、主题明了 回答 干什么、用什么方法、解决什么问题 题目大小要适中，防止“大题目、小课题”围绕“科学问题”反复推敲 要求与“研究目标”呼应 神经元凋亡时SP1对BH3-only蛋白Bim的转录调控 细胞凋亡 时SP1对BH3-only蛋白Bim的转录调控 神经元凋亡时 BH3-only蛋白Bim的转录调控 神经元凋亡时SP1对BH3-only蛋白Bim的 调控 SP1对BH3-only蛋白Bim的转录调控 SP1对神经元凋亡的调控作用 关键词：SP1/Bim /基因调控/信号转导/神经元凋亡 摘 要 研究内容和意义（限400字） 1. 工作基础 继续和深入 发表和未发表 创新 2. 科学问题 重要！不能缺！中肯 3. 预实验 针对“问题”的预实验结果 4. 工作假设 思想性、创新性 5. 主要方法 可靠性第一 先进性第二 6. 研究目标 明确、具体 7. 研究意义 理论性和应用性 神经元凋亡时SP1对BH3-only蛋白Bim的转录调控 我们已经证明了撤钾诱导神经元凋亡时JNK/c-Jun 和PI3K/Akt/FKHRL1信号通路不参与BH3－only蛋白Bim的上调。 那么，Bim上调的转录机制是什么？启动子5末端序列续减分析确立了诱导Bim表达的启动子核心区，进而发现一个典型的转录因子SP1结合序列位于其中。进一步实验显示：神经元凋亡时SP1被激活；负显性SP1和SP1-DNA结合抑制剂mithramycin A抑制了Bim上调和神经元凋亡。由此，我们首次提出了Bim 上调的新机制，即：神经元凋亡时转录因子SP1被激活，激活的SP1直接调控Bim的诱导表达。本项目拟进一步采用腺病毒表达技术以及启动子定点突变、EMSA和CHIP方法，旨在获得SP1直接调控Bim基因的可靠证据。本项目将阐明SP1对促凋亡蛋白Bim的调控作用和机制、为确立SP1作为神经退行性疾病治疗的新靶点提供更充分的科学依据 . 立 项 依 据 1. 关键! 占50% 文笔流畅、层次分明、逻辑性强 2. 摆事实、讲道理 我（而不是别人）能做的理由 意义 思想性 与摘要呼应 3. 自己的工作为依据 图文并茂 规范 4. 参考文献 时效性 自己的文章 规范化 5. 深入浅出 内行、外行读得懂 6. 人文文化 素质 精神 动人的故事 研究内容、研究目标与拟解决的关键问题 研究目标 要求：明确、具体 解决学术问题，与题目相呼应： 神经元凋亡时SP1对BH3-only蛋白Bim的转录调控 获得SP1直接调控bim基因表达的可靠证据，阐明促凋亡蛋白Bim由SP1转录调控的新机制，为确立SP1作为神经退行性疾病治疗的新靶点提供更充分的科学依据。 研究内容 （紧紧围绕研究目标） 1.??证明bim启动子核心区的SP1结合序列是否介导了bim基因的上调 为了证实bim启动子核心区的SP1结合序列是否介导了bim基因的上调，将其中的SP1结合序列进行点突变，使其不能结合SP1；确定这一突变是否能够消除bim启动子的撤钾反应。 2.??分析SP1 是否能够与bim启动子核心区的SP1结合序列结合 应用EMSA (Electrophoretic Mobility Shift Assay)技术，证实bim启动子核心区的SP1 结合序列是否能够与SP1结合；进一步采用CHIP(Chromatin immunoprecipitation)方法，获得SP1与bim启动子核心区在细胞内结合的证据。 3.??从 bim 的mRNA 和蛋白质水平，观察负显性SP1是否能够抑制撤钾诱导的bim基因的上调 质粒转染CGNs的转染率只能达到0.1-1.0 %，腺病毒的感染率可达70－80%[1]。 因此，构建dnSP1的腺病毒载体Ad-dnSP1，感