气相色谱-质谱联用技术测定蜂产品中甜蜜素的含量.docVIP

气质联用法测定含蛋白食品中甜蜜素的含量 沈伟健 (江苏出入境检验检疫局食品实验室 江苏 南京 210001)μg/mL范围内方法的线性良好， 5，10和 25 mg/kg等三个添加水平下，回收率稳定在75.0～100.0%之间，变异系数CV %≤12.1 %，灵敏度高，检测限为1.0 mg/kg。 关键词：含蛋白食品；甜蜜素； 气相色谱-质谱联用；确证方法 Determination of sodium cyclamate in foods containing protein by gas chromatography-mass spectrometry SHEN Weijian, HUANG Juan, SHEN Chongyu, LIN Hong, ZHAO Zengyun, CHEN Huilan, XU Jinzhong (Laboratory of foods, Jiangsu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of PRC, Nanjing 210001, China) Abstract: A confirmatory method for the determination of sodium cyclamate in foods containing protein by gas chromatography-mass spectrometry was developed. Sample is protein denaturized by trichloroacetic acid. Then cyclamate was quantitatively converted to N,N-dichlorocyclohexylamine with sodium hypochlorite, and extracted by n-hexane, and determinated by gas chromatography-mass spectrometry. Linearity of method was good from 2 to 50 μg/mL, and the recoveries were stably in the range of 75.0 to 100.0% at three spike levels(5, 10 and 25 mg/kg), and CV %≤12.1 %，and LOD= 1.0 mg/kg. Key words: foods containing protein； cyclamate； gas chromatography-mass spectrometry； comfirmatory method 甜蜜素化学名为环己基氨基磺酸钠，是一种非营养性的低热量合成甜味剂，有良好的水果风味，甜度可为白糖50-60倍，且口感好，价格低廉，被广泛应用于饼干、糕点、冷冻食品、调味品、果酱、果冻、清凉饮料、蜜饯等。近年来发现甜蜜素可能有致癌性，其代谢产物环己胺对心血管系统和睾丸有毒理作用，因此日本等国已经禁止甜蜜素作食品添加剂来使用。有关的检验方法有紫外分光光度法[1]、离子色谱法[2]、气相色谱法[3]，液相色谱法[4]和气相色谱-质谱联用法[5,6]。其中，液相色谱法是目前应用较为普遍的方法，较早期文献大多采用亚硝酸钠或2，4，6-三硝基苯磺酸等作衍生化剂对甜蜜素进行柱前衍生化，再由液相色谱仪进行测定，但是均存在灵敏度较低等缺点；目前多数采用次氯酸钠作衍生化试剂，灵敏度虽有所提高，但是最后制成的样品溶液的溶剂多为非极性试剂如正己烷，会造成反相液相色谱柱效下降；而且由于甜蜜素衍生化产物没有特征吸收基团，选择紫外检测器低波长进行分析时容易受基质干扰。气相色谱法也存在干扰现象，尤其是在分析富含蛋白的基质可靠性就更差，检测结果的假阳性率较高，一般只适合作初筛方法。也有文献报道气质联用法[5,6]用于食品中甜蜜素的测定，其前处理中运用亚硝酸钠在酸性条件下对甜蜜素进行衍生化，生成的环己基亚硝酸酯在EI源下得到的碎片离子为83，55，41，27 m/z，但事实上这些离子只是由衍生化产物中的环己基基团带来的，而非环己基亚硝酸酯本身的特征离子。而且聚二甲基硅氧烷类毛细管柱柱流失物在EI源下也广泛存在着这些碎片，因此以这些离子作为监测离子，尤其在低浓度时很难消除由柱流失物和含环己烷基团的其它有机物带来的干扰，最后导致很容易出现假阳性结果。因此开发一种简单快速、抗干扰能力强、稳定可靠的可用于食品中甜蜜素含量测定的确证方法是很有必要的。 本文运用三氯乙酸对样品基质中的蛋白进行变性净化，酸性条件下次氯酸钠衍生化生成N,N-二氯环己胺，由气相色谱-质谱联用法测定。