综合性实验一质粒DNA的小量制备和电泳鉴定.pptVIP

3) 等凝胶温度降至大约50－60℃以下时，加入1 mg/L溴化乙锭（EB）至终浓度为0.5μg/mL ；摇匀并轻快地倒入水平板中，除掉气泡。 4) 凝固后，将梳子轻轻拔出。 5) 去掉胶带，将水平板放入加有1×TAE电泳缓冲液的电泳槽中，并且使电泳缓冲液高出凝胶约1mm。 6) 上样Buffer 和DNA 混匀后点样，记录点样次序。 7) 在水平板两边的点样孔中分别加入marker即分子量标记。 8) 盖好电泳槽盖子，选择适当的电泳电压（≤5V/cm）及电泳方向(DNA阴极阳极），开始电泳。 9) 当色素接近胶的尾端，停止电泳，样品在紫外灯下观察、成像。 五、结果 Marker 质粒DNA 质粒的存在使宿主具有一些额外的特性，如对抗生素的抗性或致育因子等。 * 综合性实验二 质粒DNA小量制备和电泳鉴定 一．实验目的 1．掌握碱变性裂解法制备质粒DNA的原理。 2．了解质粒DNA的性质和用途。 3. 掌握DNA琼脂糖凝胶电泳的原理和操作。 4. 掌握质粒DNA（闭环和开环构型）的电泳分离鉴定。 质粒 plasmid 质粒是细菌染色体外的环形双链DNA分子，能在宿主细胞内独立自主的进行复制。 质粒 基因工程中目的基因的运载工具。 质粒载体 大小可从1kb到200kb 筛选标记 多克隆位点 酶切位点 复制原点 质粒的特性： 能独立自主进行复制。 细菌内的共生型