第四章 微生物药物制造工艺.pptVIP

生物制药工艺学教学课件 生物工程教研室 刘静霆 第四章 微生物药物制造工艺 生物工程教研室 刘静霆 §1 微生物药物概述 §2 抗生素制造工艺 §3 其他微生物药物 §1 微生物药物概述 一、微生物药物的定义和发展 二、微生物药物的分类 三、微生物药物研发进展 §1 微生物药物概述 3、抗生素的发展方向： ①加强基础理论研究和新技术的应用 ②选育抗性菌种和新型菌株 ③大力发展农业抗生素 （一）抗生素类药物 1、抗生素的命名 依动植物学、菌属学名称而定－－青霉素、链霉素、灰黄霉素、黄连素、蒜素、鱼素等； 依族命名－－四环素、氯霉素等； 依地名及俗名而定－－创新霉素、庐山霉素、平阳霉素、井冈霉素、土霉素等。 §1 微生物药物概述 §2 抗生素制造工艺 §3 其他微生物药物 (二）链霉素的制备 1、菌种--灰色链霉菌 防止链霉菌株变异的措施： 冷冻干燥法或砂土管法保存菌种，限制有效使用期； 0-4℃暂存，限制使用期限； 严控传代次数，一般以3次为限； 定期纯化筛选，淘汰退化菌落； 不断选育出高发酵单位的新菌种。 2、发酵工艺 3、提炼 分类 多氧大环内酯类抗生素－－按碳原子数可分为12元环、14元环和16元环三类，如红霉素、竹桃霉素、吉他霉素、螺旋霉素等； 多烯大环内酯类抗生素－－具有26-28元大环内酯，含4-7个共轭双键，如制霉菌素 蒽莎大环内酯抗生素－－又叫环桥类抗生素，如利福霉素 （三）制备工艺 1、菌种 红色链霉菌 多组分 主要有效组分---红霉素A 其他成分-----红霉素B、C、E 3、提取 （三）四环素的制备工艺 1、菌种 金色链霉菌（Streptomyces aureofaciens） 2、发酵工艺 3、提取 Thank You！ 冷冻管 母斜 孢子培养液 孢子培养 37℃,7~10d,避光 一级种子罐 繁殖罐 发酵罐 放罐 提取 微孔接种 种子培养 种子培养 发酵 31℃,pH=6.6~7.2， 6~7d 33℃， 40h 2、发酵工艺 35℃,65h 37℃, 7~9d, 避光 发酵液 〔预处理，过滤〕 0.1%甲醛，3%ZnSO4 NaOH 调pH7.8~8.2 滤洗液 〔树脂吸附〕 CAD-40树脂吸附，浓度3.5万U/ml 流速1/25(V/V.min) 饱和树脂 〔树脂洗涤〕 40℃洗涤，氨水pH10 洗涤后的 饱和树脂 〔树脂解吸〕 丁酯用2%氨水混合，丁酯用量 1:0.5~1,流速1/130(V/V.min) 丁酯洗脱液 〔提取分离〕 pH4.7~5.2 醋酸缓冲液 酸性缓冲液 〔结晶、分离〕 碱化pH9.8~10 加热38~40℃ 湿晶体 〔干燥〕 制颗粒，干燥 (78~80 ℃ /740mmHg) 红霉素 碱成品 四、四环类抗生素 （一）、概述 结构上都含有四并苯母核 （二）四环素性质 1、溶解性： 在pH4.5-7.5之间难溶于水 游离碱能溶于吡啶、甲醇、丁醇等有机溶剂和稀酸、稀碱 盐酸盐能溶于水，不溶或微溶于有机溶剂 2、稳定性： 干燥低温稳定 水溶液碱性条件下不稳定，酸性条件下（pH4-5）较稳定 5.基因改组（DNA Suffling） §2 抗生素制造工艺 一、β-内酰胺类抗生素 二、氨基糖苷类抗生素 三、大环内酯类抗生素 四、四环素类抗生素 一般制备过程 培养发酵： 发酵液预处理 固液分离 胞内产物 细胞破碎 固液分离 胞外产物 初步纯化 精制 初步纯化方法： 沉淀、吸附、萃取、超滤 精制方法： 层析、电泳、结晶 选择方法依据 1、产品性质： 化学组成、分子量、稳定性、溶解度、解离特性等 2、主要杂质属性 3、方法前后衔接要求 4、产品质量要求 一、β-内酰胺类抗生素（一）结构与性质 a 青霉烷* b 青霉烯 c 头孢烷 d 头孢烯* e单环β-内酰胺 f 碳青霉烷* g 碳青霉烯* h 碳头孢烷 I 碳头孢烯 j 氧青霉烷* k 氧青霉烯 l 氧头孢烷 m 氧头孢烯 *天然产物 C NH CH CH C O O C N CH CH3 CH3 COOH S Site of penicillinase action. Breakage of the β-