小鼠原始生殖细胞在生殖嵴的定位.pdfVIP

武汉华中农业大学 2006．10 主要用于ES细胞的分离培养，其主要功能是抑制干细胞的体外分化。培养液中加入LIF后，对细胞增殖起 u tt 一定的作用，其中以lOg／L效果最好，20 LIF似乎促进了精原千细胞的凋亡，至于机理还有待于进 g／L 一步研究。 cell GDNF(glialline-derived factor)是转化生长因子一B超家族的一个相关成员。 neurotrophic 1u¨， GDNF能促进神经系统中多种 它的信号转导受体复合物包括酪氨酸激酶Ret受体和GDNF家族受体a 类型神经元存活和分化。在中枢神经系统中，胶质细胞为神经元提供营养因子。与此相类似，睾丸中支持 细胞为生殖细胞提供营养因子。睾丸中支持细胞表达GDNF作为精子发生的旁分泌调节因子，GDNF受体表 pg／L的 达于未分化型精原细胞。本试验中牛精原干细胞数目有随着hGDNF浓度增高而增高的趋势，80 hGDNF能显著提高精原干细胞的数量，至于再高浓度的hGDNF能否起到更大的作用，还是会抑制精原干细 胞的增殖还有待于进一步验证。 SSC的鉴定主要包括形态学鉴定、细胞表面特异性标记鉴定和功能鉴定。从发育生物学的角度来看， 外胚层的细胞，所以，我们可以推测SSC、PGC和ESC是三类密切相关的细胞，在很多方面存在共性，当 表明AKP染色呈强阳性，而在本研究中结果却显示SSCAKP染色呈弱阳性，这可能是SSC发生了分化的结 果。从ESC到PGC，再到SSC，可能一些基因的差次表达导致它们三者之间存在一些根本的差异。 整合素检测，免疫组化反应结果呈阳性，这说明小鼠和牛SSC表面B卜整合素是一个保守蛋白，关键基因 的氨基酸序列具有保守性。B卜整合素如果在更多物种SSC中检测到阳性，那么，p卜整合素有望成为SSC 的一个特异性的并通用的表面标记。 、 这与AKP染色结果一致。也与我们所进行的c-kitRT^PCR检测结果一致u引。为了进一步检测我们培养体 a 系形成的克隆中存在真正未分化的SSC，我们选择了Gfr1基因作为特异标志基因进行了RT-PCR检测， 结果里阳性，这从分子水平进一步说明我们观察到的克隆中存在未分化的SSC。 小鼠原始生殖细胞在生殖嵴的定位 谢冰，芮荣’，卢晓，剧世强，黄国庆，杨倚 (南京农业大学动物医学院，江苏南京210095) 摘要：本试验以昆明小鼠胚胎为材料，采用普通石蜡切片和冰冻切片技术，对不同胚龄小鼠生殖嵴进行 形态学比较研究．通过对原始生殖细胞(PGCs)在生殖嵴中的碱性磷酸酶(AP)染色定位观察，比较其数 量的增殖规律．结果表明，11．5—12．5dpc(配种后天数)阶段为采集PGCs的最佳时间． 关键阀：小鼠；生殖嵴；原始生殖细胞；定位 · 原始生殖细胞(PGCs)的发育与迁移，是哺乳动物配子发生和发育生物学的基本问题之一。PGCs的分 离培养，是进行胚胎生殖(EG)细胞建系的基础。EG细胞因在形态功能、分子标志和体内外发育潜能诸方 面与Es细胞具有相似的特征，并被证实具有种系传递能力，已被看成是获得多能干细胞的一条替代来源n1。 基金项目l国家自然科学基金和江苏省自然科学基金(BK2002108)提供资助 166 全国兽医外科学第13次学术研讨会小动物医学第1次学术研讨会暨奶牛疾病第3次学术讨论会论文集 本试验以小鼠胚胎为材料，对不同胚龄的小鼠生殖嵴进行形态学比较研究，通过对PGCs在生殖嵴中的碱 性磷酸酶(AP)染色定位观察，比较其数量的增殖规律，以期为小鼠EG细胞的分离培养提供实验参考。． 1材