吸附无细胞百白破联合疫苗.docVIP

吸附无细胞百白破联合疫苗 Xifu Wuxibao Bai Bai Po Lianhe Yimiao Diphtheria，Tetanus and Acellular Pertussis Combined Vaccine，Adsorbed 按附录ⅠA中装量项进行，应不低于表示量。 3.2.3化学检定 3.2.3.1pH值 应为5.8～7.2（附录Ⅴ A）。 3.2.3.2氯化钠含量 应为7.5～9.5g/L（附录Ⅶ G）。 3.2.3.3氢氧化铝含量 应为1.0～1.5mg/ml（附录Ⅶ F）。 3.2.3.4硫柳汞含量 应不高于0.1g/L（附录Ⅶ B）。 3.2.3.5游离甲醛含量 应不高于0.2g/L（附录Ⅵ L）。 3.2.3.6戊二醛含量 应小于0.01g/L（附录ⅥⅠ） 3.2.4效价测定 3.2.4.1 无细胞百日咳疫苗 按“吸附百白破联合疫苗”中附录2进行。以适宜的稀释倍数稀释至第一个免疫剂量，再按5倍系列稀释。免疫时间为21天。每1次人用剂量的免疫效价应不低于4.0IU；且95%可信限的低限应不低于2.0IU。如达不到上述要求时可进行复试，但所有的有效试验结果必须以几何平均值（如用概率分析法时，应用加权几何平均）来计算。达到上述要求即判为合格。 3.2.4.2白喉疫苗 每1次人用剂量中白喉类毒素的免疫效价应不低于30IU（附录Ⅺ C）。 3.2.4.3破伤风疫苗 每1次人用剂量中破伤风类毒素的免疫效价应不低于40IU（附录Ⅺ B）。 3.2.5无菌检查 依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。 3.2.6特异性毒性检查 3.2.6.1无细胞百日咳疫苗 按本品种附录中2.5项进行。 3.2.6.2白喉、破伤风疫苗 用体重250～350g豚鼠，每批制品不少于4只，每只腹部皮下注射2.5ml，分两侧注射，每侧1.25ml，观察30天。注射部位可有浸润，经5～10天变成硬结，可能30 天不完全吸收。在第10天、第20天、第30天称体重，到期体重比注射前增加，局部无化脓、无坏死、无破伤风症状及无晚期麻痹症者为合格。 3.2.7毒性逆转试验 每批供试品置37℃ 4周，按本品种附录中2.6项进行。 4保存、运输及有效期 于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起有效期为2年，自百日咳原液脱毒之日起总有效期不得超过3年。 5附录 无细胞百日咳疫苗原液制造及检定要求 6使用说明 应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。 附录 无细胞百日咳疫苗原液制造及检定要求 本品系由百日咳杆菌的培养物或其上清液，经硫酸铵盐析和密度梯度离心法提取百日咳毒素（PT）和丝状血凝素（FHA）等有效组分，经脱毒制成。用于制备吸附无细胞百白破联合疫苗。 1.制造 1.1菌种 生产用菌种应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。 1.1.1名称及来源 采用百日咳Ⅰ相CS菌株或其他适宜菌株。 1.1.2种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 1.1.3种子批的传代 工作种子批菌种启开后传代不应超过10代用于生产。 1.1.4种子批菌种的检定 1.1.4.1培养特性 于包-姜（Bordet-Gengou）培养基或其他适宜培养基上培养，各菌株应具有典型的形态及生化特性。 1.1.4.2血清学试验 取经35～37℃培养40～48小时的菌苔，混悬于生理氯化钠溶液或PBS内，制成适宜浓度的菌悬液，与Ⅰ相参考血清做定量凝集反应，凝集效价应达到血清原效价之半。并同时进行Fim2,Fim3的检测。 1.1.4.3皮肤坏死试验 取经35～37℃培养40～48小时的菌苔，混悬于PBS内，并稀释成不同浓度的菌液；取家兔或豚鼠至少2只，分别用每一稀释度的菌液皮内注射0.1ml，经72小时观察注射部位的皮肤反应，如其中1只家兔或豚鼠在注射含菌4.0×107以下稀释度的部位出现出血性坏死者，为阳性反应，判为合格。 1.1.4.4毒力试验 用体重16～18g的小鼠至少3组，每组至少10只，在麻醉状态下从鼻腔滴入经培养20～24小时、以PBS稀释的菌液0.05ml，观察14天，记录小鼠生死情况，按Reed-Muench法计算LD50，1LD50的菌数应不高于1.2×108。 1.1.4.5效价测定 按“吸附百白破联合疫苗”附录2进行。 1.1.5菌种保存 种子批应冻干保存于8℃以下。 1.2原液 1.2.1生产用种子 将工作种子批菌种启开后，接种于改良包-姜培养基或活性炭半综合培养基或其他适宜培养基上，于35～37℃培养不超过72小时，以后各代不超过48小时。传代菌种保存不得超过14天，工作种子批启开后用于生产时不应超过10代。 1.2.2生产用培养基 应选用S-S（Stainer-Scholte）培养基或其他适宜培养基。 1.2.3培养 可采用静置培养