微生物的培养与应用.ppt

专题2 微生物的培养与应用;高频考点;微生物的主要类群;一、培养基的营养构成;培养乳酸菌——添加维生素 培养霉菌——PH调至酸性 培养细菌——PH调至中性或微碱性 培养厌氧微生物——无氧环境;;;;;培养基;无菌技术主要操作要求: ①实验前应对操作空间、操作人员消毒，对所有器具和培养基灭菌。 ②实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作，另外要避免已灭菌处理材料再次污染。;三、微生物实验室培养;如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2天后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。;平板划线法： 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。;平板划线的操作方法;为什么在操作的第一步以及每次划线??前都要灼烧接种环？;在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？;稀释涂布平板法： 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。;;1、根据培养基的用途可分为:; ;鉴别培养基;2、统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计一定容积的样品中微生物数量。 ②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。;(2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。;②为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 ③计算公式：;土壤取样 → 样品稀释 → 取样涂布→ 微生物培养 → 观察并记录结果 → 细菌计数; 在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的_____将尿素分解成了____。氨会使培养基的碱性_____，PH______。因此，我们可以通过检测培养基____变化来判断该化学反应是否发生。; 在以_____为唯一氮源的培养基中加入______指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变___ ，说明该细菌能够_________ 。;1、纤维素酶;(1)筛选纤维素分解菌的方法是__________ 该方法可以通过______反应直接筛选。;;土壤取样;土壤取样;分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是(　　) A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 B．富集培养这一步可省略；但培养纤维素分解菌少 C．经稀释培养后，用刚果红染色 D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上;【解析】经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色，设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。;【资料三】刚果红染色法;生物柴油;（1）用于生产生物些油的植物油不易挥发，宜选用_______、_______方法从油料作物中提取。 （2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供_______，培养基灭菌采用的最适方法是____________法。;（3）测定培养液中微生物数量，可选用_____________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测__________，以确定其应用价值；为降低生产成本，可利用_________技术使脂肪酶能够重复使用。 （4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_________技术。;2、某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。 （1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_______和_______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和______。 （2）为了使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。;（3）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。 （4）如果要检测水中是否含有大肠杆菌，培养基中还应加入_______。; (2010年青岛市模拟)啤酒是我们日常生活中最常见的饮料之一。生产过程大致如下：将经过灭菌的麦芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌种后输入发酵罐。初期，酵母菌迅速繁殖，糖度下降，酒精浓度渐渐上升，泡沫不断增多；当糖度下降到一定程度后，结束发酵；最后分别输出有形物质