冷冻切片技术和其作用.pdfVIP

学术论文盈 冷冻切片技术及其作用 冷冻切片是采用“冷冻”的方法使组织在较短时间有可能切成薄片，其原理是利用 物理降温的方法，使组织达到一定的硬度进行切片的一种方法。 de 1818年HalstedRiemer首创冷冻切片技术，1905年由Louis B．Wilson在Mayo Clinic成功地完成了第一例冷冻切片诊断至今已有i00多年的历史。一百多年来，冷冻 切片已被用来作为一种工具，主要在外科手术中对患者进行快速诊断，并在此基础上立 即决定治疗方法。目前大多数医院已具备开展冷冻切片的条件。 冷冻切片技术在临床上主要用于某些疾病在术前无法通过活检确定病变性质，而只 能通过在术中切取病变组织，经病理诊断来确定治疗方案。其次是一些特殊检查需要保 持组织的抗原性或酶的活性不被破坏时，也需采用冷冻切片技术。例如，脂肪染色、肾 穿刺活检的免疫荧光标记、酶组织化学及特殊抗原的免疫组化检测等，都需要通过冷冻 切片来完成。因此，冷冻切片技术已成为病理科一项常规技术。 冷冻切片是病理医师、病理技师和冷冻切片机完美结合的体现，手术中快速活体组 织病理学检查是临床医师在实施手术过程中，就与手术方案有关的疾病诊断问题请求病 理医师进行紧急会诊。作为病理医师，冷冻切片的诊断是对病理医师的一种挑战，病理 医师往往必须在极少的时间内完成对于患者至关重要的病理诊断。除了需要迅速联想鉴 别诊断之外，还有很多的陷阱和人为假象，增加了冷冻切片诊断的风险，不像石蜡切片 那样组织可以得到充分的固定和完美的处理，病理医师可以充足的时间悠闲的进行判读， 这需要病理医师有较高诊断水平。 冷冻切片也是对病理技师的一种考验，是病理医师快速做出正确病理诊断的前提和 保证。病理技师在短时间内要制出高质量的冷冻切片，不仅需要病理技师具有娴熟技术， 对病理医师诊断需求的理解，对冷冻切片机功能的了解。而且需要对冷冻切片原理的理 解与合理应用，掌握冷冻切片温度与切片的关系，组织温度的变化可影响其软硬程度。 温度升高组织块变软，温度降低组织变硬。一般情况下未固定的非脂肪类组织在冷冻箱 中的温度在-20C左右较为合适，含有脂肪类组织在冷冻箱中的温度则更低；而固定过 北京分会病理专业委员会 北京分会瘾理专业蚕贯会霸理技术学组 的组织在冷冻箱中的温度可适当提高，因为固定过的组织内含水较多，冷冻时组织会较 未固定的组织更硬。为达到理想切片效果则需要掌握不同组织适宜的冷冻温度。 定量组织化学研究，后来由Coons，Leduc和Kaplan设计改进成新型恒温冷冻切片机， 温度可降至并保持-30。C。恒温冷冻切片机的问世，使冷冻切片不受气候、室温等外界 因素的影响，可以在一个相对恒定环境内进行。同时还可视不同的组织选择不同的冷冻 温度来进行切片，冷冻切片的质量得到很大提高。而最近推出冷冻切片机，功能更加完 备，其双压缩机的配置，使冻头和箱内温度可以达到一致，从而进一步保证了在短时间 内制备高质量冷冻切片的功能，同时有许多智能化、自动化、人性化的设计，使操作更 方便、更简单。 冷冻切片需要高水平的病理医师、技术精湛的病理技师，同时也需要功能完备、先 进的仪器设备。上个世纪八、九十年代，恒温冷冻切片机逐步替代术中快速石蜡切片的 方法，这主要是冷冻切片速度快、操作简单，制片质量稳定，取材范围更大，可同时进 行多块和多例组织制片，医疗安全性更高，在病理科得以普遍使用。 冷冻切片包含冷冻、切片、固定、染色等环节。不同组织的冷冻时间、冷冻温度、 切片厚度、固定方式、染色程度等除了与病理技术人员经验和技能外，与冷冻切片机相 应功能保证是紧密相联系的。除了相应的经验与技巧外，还与相关的理论支持是分不开 的。 尽管使用冷冻切片长达一个世纪，但在已出版的教科书中对冷冻切片技术理论和实 践描述甚少，有些由于技术设备的进步，已经明显过时或缺乏科学性，需要去更新。病 理技术工作是一个经验性的工作，不同的技术人员在完成同一工作中的工作质量是有所 不同的，如何使经验性的工作成为规范性技术标准。作为一名病理技术人员对一项技术 不仅要掌握它的技能与技巧、掌握它的流程与方法，而且还要了解它的历史、它的发展、 它的作用、它的原理、它的责任。不